[发明专利]人MOG抗原表位肽、抗原、抗体、应用及化学发光试剂盒

说明书

本发明涉及人MOG抗原表位肽、抗原、抗体、应用、体外诊断试剂盒和检测人MOG‑Ab的化学发光试剂盒。所述人MOG抗原表位肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列之一。所述检测人MOG‑Ab的化学发光试剂盒采用双抗原夹心法检测人MOG‑Ab，并且包含化学发光底物。本发明的人MOG抗原表位肽具有良好的抗原性，能够产生高度特异性的单克隆抗体和多克隆抗体，所述化学发光法试剂盒具有灵敏度高、特异性强、价格低廉、稳定且有效期长、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单自动化程度高等优点。

技术领域

本发明属于多肽化学和免疫学领域，具体涉及人抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗原表位肽、用该抗原表位肽制备的MOG特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体、所述抗原在制备人MOG-Ab体外检测试剂盒上的应用、人MOG-Ab体外诊断试剂盒、以及一种用于定量检测样本中人MOG-Ab的化学发光试剂盒及其制备方法。

背景技术

目前关于MOG-Ab病的确切致病机制尚不清楚，大部分研究认为，识别MOG抗原的特异性B细胞可能存在于外周血，但由于骨髓中缺乏MOG抗原表达，使MOG特异性未成熟B细胞处于无反应状态，同时由于缺乏相应的辅助T细胞(Th细胞)辅助作用，识别MOG的特异性B细胞不能活化，而仅在外周血中增殖。当嗜神经病毒感染机体时，血-脑屏障被破坏，MOG抗原漏入外周，激活CD4+T细胞，对MOG特异性B细胞募集和激活增加，产生大量MOG-IgG；同时促炎T细胞进入中枢，募集MOG特异性B细胞流入中枢，产生相应抗体。在一些体外实验中已证实MOG-IgG可以通过补体和抗体途径介导细胞杀伤作用。而CD4+T细胞在一些细胞因子诱导下分化为Th1、Th17、Th9细胞，分泌TFN-γ、白细胞介素(IL)-12、IL-23、IL-17A等因子，通过趋化因子吸引不同种类免疫细胞，如髓样细胞、巨噬细胞等，诱发炎性级联反应，介导中枢髓鞘脱失。还有研究者在表达识别MOG的特异性T细胞受体的转基因老鼠中可以观察到自发的视神经炎，支持T细胞在MOG-Ab病中起重要作用。

MOG-Ab病患者的血液中MOG-Ab(抗MOG抗体)的量会有所升高，应用酶联免疫吸附法(ELISA)或蛋白印迹法、细胞转染技术(cell-basedassay，CBA)、四聚体放射免疫法(tetramer radioimmunoassay)均能检测出MOG-Ab。

本发明采用化学发光技术，制备定量检测MOG-Ab的试剂盒。因此，寻找合适的具有免疫原性的MOG抗原表位肽、制备特异性的MOG抗原、以及开发定量检测MOG-Ab的试剂盒即成了重点。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了人MOG抗原表位肽、抗原、抗体、应用及化学发光试剂盒及其制备方法。

具体而言，本发明提供了：

一种人MOG抗原表位肽，其中所述MOG抗原表位肽的氨基酸序列为如下两者之一：

(1)Tyr-Arg-Ile-Ser-Pro-Gly-Lys-Asn-Ala-Thr-Gly-Met-Glu；

(2)Tyr-Gln-Glu-Glu-Ala-Ala-Met-Glu-Leu-Lys-Val-Glu-Asp-Pro-Phe。

本发明还提供了一种MOG抗原，其是通过使本发明所述的人MOG抗原表位肽(1)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了一种MOG抗原，其是通过使本发明所述的人MOG抗原表位肽(2)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了一种人MOG抗体，其是由本发明所述的MOG抗原制备而成的单克隆抗体或多克隆抗体，其中所述MOG抗原是通过使所述的人MOG抗原表位肽(1)与载体蛋白偶联制备而成的。