[发明专利]通过有性繁殖菌种将家蚕培育成蚕虫草的方法有效
| 申请号: | 201810264555.5 | 申请日: | 2018-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN108496694B | 公开(公告)日: | 2021-06-11 |
| 发明(设计)人: | 李祥麟;伏迪;兰茹;汪永生;张驰 | 申请(专利权)人: | 苏州雷旦生物科技有限公司 |
| 主分类号: | A01G18/00 | 分类号: | A01G18/00;A01K67/04 |
| 代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王锋;赵世发 |
| 地址: | 215000 江苏省苏州市工业园区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 通过 有性 繁殖 菌种 家蚕 培育 虫草 方法 | ||
1.一种通过有性繁殖菌种将家蚕培育成蚕虫草的方法,其特征在于包括:
(1)采用有性繁殖的方式培养蚕虫草母种,并制备形成菌液:取200g去皮土豆去皮、切块,加4-6倍量0.1%-0.3%的NaCl溶液煮沸10-15min,之后过滤获得滤出液;向所述滤出液中依次加入20g葡萄糖和20g琼脂,搅拌加热至琼脂完全溶解后于110-125℃高压蒸汽灭菌锅中灭菌25-35min形成PDA培养基,取出后摆成斜面备用;
选择子囊果孢子的子座长度为4-5cm的虫草,使其在无菌条件下弹射出孢子,孢子落入PDA培养基中形成菌种;
于1000mL基液中加入200g土豆、10g牛肉膏、1gKH2PO4、20g葡萄糖、0.5g MgSO4·7H2O、5-10g蛋白胨形成液态培养基,取8-9块1cm2的菌种置入所述液态培养基中,并以120-180r•min-1、20-23℃条件下振荡培养3-5d获得菌丝;
将形成有菌丝的液态培养基于18-20℃培养24-48h,将生长有菌丝的液态培养基稀释形成悬浮液,之后将所述悬浮液与壳聚糖复合物按照1-1.5L:20-50g的比例混合形成喷淋液,以所述悬浮液浸泡桑叶0.5-2h后,向所述桑叶喷淋所述喷淋液;
其中,所述壳聚糖复合物包括40-70wt%壳聚糖、氨基酸、 20-30wt%维生素C、5-10wt%有机钙、3-5wt%甲基磺酸;
(2)选择4龄第6天到5龄第1-2天的蚕虫,并采用乙醇和丙三醇的混合液消毒吹干,将采用乙醇和丙三醇清洗后的蚕虫以红外线灭菌的方式进行杀菌处理,将消毒后的蚕虫转移至培养室中采用表面形成有所述喷淋液的桑叶喂养3-5天,并采用所述悬浮液保持培养室内的湿度为65-70%,保持培养室内的温度为18-21℃;
(3)之后将感染的蚕虫取出置入发菌室并黑暗培养5-7天,黑暗培养的初始温度为16-18℃,之后以每天增加1℃的速度增加至21-23℃;黑暗培养的环境湿度为65-70%;
(4)将黑暗处理后的蚕虫置于白天20-24℃、夜间10-14℃的光亮环境下转色培养,直至蚕虫表面呈透明黄色,所述培养环境的湿度为65-70%;
(5)将转色培养后的蚕虫于20-23℃、湿度为80-85%的环境中生长30-35天,至蚕虫长出子实体,子实体生长至415cm后即可采摘。
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