[发明专利]一种海藻肥的制备方法在审

申请号：	201810257514.3	申请日：	2018-03-27
公开（公告）号：	CN108530156A	公开（公告）日：	2018-09-14
发明（设计）人：	丁玉庭;顾赛麒;吕飞;唐文燕;刘璘	申请（专利权）人：	浙江工业大学
主分类号：	C05G3/00	分类号：	C05G3/00;C05F17/00;C12P1/02;C12P1/04;C12R1/785;C12R1/885;C12R1/01
代理公司：	杭州天正专利事务所有限公司 33201	代理人：	黄美娟;朱思兰
地址：	310014 浙江省杭州***	国省代码：	浙江;33
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摘要：
搜索关键词：	海藻肥海藻制备预处理生物活性物质发芽率不良环境负面影响化学物质抗生物质生物发酵依次处理植物激素植物作用腥味内容物热降解酸降解天然的无残留根系降解茎叶溶出脱除抗病升高抗旱生长土壤保留
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【权利要求书】：

1.一种海藻肥的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)原料预处理

将原料海藻用水浸泡、清洗，沥干后，用剪刀剪碎，再经胶体磨粉碎，得到海藻泥，于0～5℃保存备用；

(2)海藻生物发酵降解

取步骤(1)准备好的海藻泥，加入10⁴～10⁷cfu/mL毛霉菌种液，密封后在温度30～50℃、pH值7.5～10.5的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵2～7d，接着加入10⁴～10⁷cfu/mL里氏木霉菌种液，密封后在温度20～28℃、pH值3.5～5.5的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵2～6d，之后加入10⁴～10⁷cfu/mL琼氏不动杆菌菌种液，密封后在温度20～40℃、pH值6～9的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵1～6d，得到海藻生物发酵液；

所述海藻泥与毛霉菌种液、里氏木霉菌种液、琼氏不动杆菌菌种液的质量比为1：3～10：3～10：3～10；

(3)海藻酸降解、热降解

在步骤(2)所得海藻生物发酵液中，加入10⁴～10⁷cfu/mL嗜热链球菌菌种液，在温度25～50℃、pH值3～7的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵1～6d，得到酸降解液，取所得酸降解液，密封后，置于121～125℃、1.0～1.5Mpa下进行热处理0.5～4h，得到海藻降解物；

所述海藻生物发酵液与嗜热链球菌菌种液的质量比为1：0.05～0.2；

(4)干燥

待步骤(3)所得海藻降解物冷却至室温，之后干燥至水分含量为10％～40％，粉碎，过100～250目筛，得到成品海藻肥。

2.如权利要求1所述海藻肥的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述原料海藻为：海带、紫菜或裙带菜。

3.如权利要求1所述海藻肥的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述用水浸泡、清洗的操作方法为：将原料海藻按料液质量比1：5～20加入清水中，浸泡2h，然后取出用清水冲洗除去泥沙。

4.如权利要求1所述海藻肥的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述沥干采用R＝32cm的漏勺，沥水后的海藻含水量为40％～70％。

5.如权利要求1所述海藻肥的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述毛霉菌种液按如下方法获得：

毛霉XH-22，采用固体平板基，28℃培养72h，之后用无菌生理盐水将孢子洗脱，洗脱液经高速分散机均质后，用血球计数板在显微镜下计数，最后将菌液按比例稀释至10⁴～10⁷cfu/mL，得到所述毛霉菌种液；

所述固体平板基的组成为：马铃薯浸粉6g/L、葡萄糖20g/L、琼脂20g/L，溶剂蒸馏水；pH值5.6，灭菌20min。

6.如权利要求1所述海藻肥的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述里氏木霉菌种液按如下方法获得：

将里氏木霉接种于PDA液体培养基中进行有氧培养，在温度50℃下培养24h，之后将菌液按比例稀释至10⁴～10⁷cfu/mL，得到所述里氏木霉菌种液；

所述PDA液体培养基的组成为：马铃薯浸粉6g/L、葡萄糖20g/L，溶剂蒸馏水；pH值5.6，灭菌20min。