[发明专利]一种可视化检测转基因食品的方法

权利要求书

1.一种可视化检测转基因食品中转基因含量的方法，其特征在于，所述方法，包括：

利用具有特异性识别功能的CaMV 35S特定核酸探针和与之互补的模板序列；当食品样品中特异性启动子CaMV 35S存在时，可以与其序列互补的相应模板结合形成环状；环状DNA同时包含了G-四链体的互补序列；经过T4-DNA连接酶连接后，在Phi29聚合酶作用下引发滚环扩增，扩增产物中所包含G-四链体；G-四链体与氧化血红素Hemin形成的具有过氧化物酶催化活性的DNA人工模拟酶；DNA酶催化ABTS进行显色反应；

提取不同比例转基因食品样品的基因组，结合模板序列引发滚环扩增并将扩增产物形成DNA酶催显色反应，建立紫外吸收强度与食品样品中转基因含量的回归曲线方程；当需要检测未知食品样品时，提取未知食品样品基因组并在相同的条件下进行反应获取紫外吸收强度，并将结果代入回归曲线方程，即获得未知样品中转基因含量；其中，含量的检测范围为0.1pmol/L-1000pmol/L；

所述T4-DNA连接酶连接中T4-DNA连接酶的浓度为250units/25μL；所述连接的反应时间为40-70min；所述滚环扩增中聚合酶的浓度20units/25μL；所述滚环扩增的反应时间为40-60min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述模板序列，与CaMV 35S特定核酸探针两端碱基序列完全互补配对，中间包含有一段与G-四联体互补的特定核酸序列。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述模板序列如SEQ ID NO:1所示。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的CaMV 35S特定核酸探针的序列如SEQ ID NO:2所示。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述显色反应的试剂是ABTS。

6.根据权利要求1～5任一所述的方法，其特征在于，所述转基因食品为以下任意一种或者多种：大米、玉米、大豆、番茄，或者上述转基因食品的附加产品。