[发明专利]一种生殖器官及腺毛组织特异启动子GhS及其应用有效
申请号: | 201810242016.1 | 申请日: | 2018-03-22 |
公开(公告)号: | CN108277224B | 公开(公告)日: | 2021-08-06 |
发明(设计)人: | 左开井;孙文杰;高正银;陈云 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/11;C12N15/10;C12N15/63;C12N1/21;C12R1/19;C12R1/01 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 庄文莉 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生殖器官 腺毛 组织 特异 启动子 ghs 及其 应用 | ||
1.一种启动子GhS,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一组用于扩增根据权利要求1所述启动子GhS的外侧引物对,其特征在于,所述外侧引物对的序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。
3.一组用于扩增根据权利要求1所述启动子GhS的内侧引物对,其特征在于,所述内侧引物对的序列如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示。
4.一种重组载体,其特征在于,包含根据权利要求1所述的启动子GhS。
5.一种根据权利要求1所述的启动子GhS的用途,所述用途具体为启动子GhS在驱动植物中目的基因在特定组织中表达的应用;所述植物包括棉花、拟南芥;所述组织包括生殖器官、纤维。
6.一种根据权利要求1所述的启动子GhS的制备方法,其特征在于,利用生物克隆法或人工合成法进行制备。
7.根据权利要求6所述的启动子GhS的制备方法,其特征在于,所述生物克隆法具体包括以下步骤:
步骤1、提取棉花基因组DNA;
步骤2、以所述DNA为模板,依次用权利要求2所述的外侧引物、权利要求3所述的内侧引物进行扩增;
步骤3、将所述扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,即得启动子GhS。
8.根据权利要求6所述的启动子GhS的制备方法,其特征在于,所述人工合成法具体包括以下步骤:
步骤1、根据启动子GhS的正链和负链序列,分别合成出长度150~200bp、具有粘性末端的单链寡核苷酸正链片段和单链寡核苷酸副链片段;
步骤2、将所述单链寡核苷酸正链片段和单链寡核苷酸副链片段分别退火,形成带有粘性末端的双链寡核苷酸片段;
步骤3、混合所述双链寡核苷酸片段,经T4 DNA连接酶催化组装成一个完整的启动子GhS。
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