[发明专利]流式细胞仪及粒子的检出方法

说明书

本发明提供一种流式细胞仪使接受过特别训练的技术员以外的其他人员能在必要时轻松地提供高可信度的流式细胞术结果。流式细胞仪10包括：输入部60，接受用于确定测定项目的信息的输入；条件选择部71，从所述输入部60接受的所述用于确定测定项目的信息所对应的一个或数个测定条件中选择测定条件；以及测定部65，具有供含有试样中的粒子的含粒子液体通过的流动室20，与通过所述条件选择部选择的测定条件相应地对通过所述流动室20的所述含粒子液体中的粒子进行光学测定。

技术领域

本发明涉及一种流式细胞仪及粒子的检出方法，更具体而言，本发明涉及一种能够简便地设定测定条件的流式细胞仪及粒子的检出方法。

背景技术

流式细胞术这一方法会用到能以鞘流方式逐个逐个地检出粒子的流式细胞仪，通过光学方式检出分散于液体中的各个粒子的大小、结构、荧光强度等，并根据检出的信息计测粒子的数目、分布。关于流式细胞仪，既存在能根据用户需求设定粒子的测定条件等参数的应用范围较广的通用流式细胞仪，也存在专门检出特定种类粒子的专用流式细胞仪(例如专利文献1)。

流式细胞术能通过与荧光免疫染色进行组合而检出细胞表面、细胞内存在的各种抗原，对细胞分析来说非常有用。最初开发的流式细胞仪只能使用一种荧光色素逐种逐种地分别检出抗原。即，细胞表面存在数种抗原时，需要根据想要检出的抗原数目相应地增加化验次数，而且需要与化验次数相应地增加测定所需要采集的细胞数目。而现在，流式细胞术中会用到的分析技术取得了飞跃性进步，荧光色素稳定化、多色化，用于激发荧光色素的各种各样的激光光源被开发出来，基因重组技术之下多种抗原的大量生产使检出抗体的产品线不断充实。另外，人以及鼠的全基因序列已得以确定，许多蛋白质、表面标志得以鉴别。因此能作为流式细胞术分析对象的抗原、细胞内标志的数量变得非常庞大。在这一分析技术进步、分析对象抗原等增加的背景之下，目前流式细胞术领域的主流技术是在一次化验中同时测定数种至十几种抗原的多色流式细胞术。

与此同时，多色流式细胞术中存在一个问题-包括对细胞进行免疫染色的阶段在内，测定条件的设定非常复杂。例如，伴随着荧光色素的多色化，能一次性分析的抗原数目得以增加，但同时，要同时检出数种荧光色素就需要针对每一荧光色素、每一激发激光光源分别调整流式细胞仪的灵敏度来实现各荧光色素最大精度的检出。另外，荧光色素之间的某些组合方式下会出现一种荧光色素对其他荧光色素的荧光强度起干扰作用或放大作用的情形，因此需要了解相互组合的荧光色素之间的适配情况。另外，两种以上的荧光光谱重叠的波长区域则需要对荧光强度的实测值进行荧光补正。另外，在将免疫染色后的细胞供给流式细胞仪之前需要掌握抗体的特性信息，举一例来说，要通过一次化验检出多种抗原不仅需要根据作为检出对象的细胞种类来选择抗原，而且还要清楚检出抗体是否针对与靶抗原同时检出的其他抗原呈交叉反应性，出现交叉反应性的不同抗原需要归于不同的化验。综上，要想通过多色流式细胞术获得可信度高、再现性好的结果，负责多色流式细胞术的操作人员必须具备足以进行如上所述的复杂的条件设定的庞大知识量。

为培养能使用复杂的多色流式细胞术的技术员，流式细胞仪厂商会为流式细胞术从业者召开研讨会，力图普及流式细胞术技术、提高技术员水平。此外，日本细胞测定学会（JapanCytometrySociety）设立了细胞测定技术员认定制度，旨在培养一定水平以上的细胞测定技术员、推动技术水平提高。

即，目前为应对如上所述的多色流式细胞术的复杂性而出现的各种举措均着眼于培养、教育技术员，而非对流式细胞仪的硬件、软件进行改良。

现有技术文献

专利文献

【专利文献1】日本专利（特开）2003－287491号公报。

发明内容

发明要解决的技术问题