[发明专利]促进抗体生成的疫苗稀释剂及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种促进抗体生成的疫苗稀释剂，其制备方法为：在0.5～50毫克人参皂苷和0.9毫克～200毫克亚硒酸钠中加入生理盐水定容至100毫升，再用孔径为22μm的薄膜过滤除菌，得促进抗体生成的疫苗稀释剂。本发明还同时公开了上述疫苗稀释剂的用途：促进疫苗诱导的抗体生成。该稀释剂不仅能提高IgG1抗体的产生而且还能促进IgG2a抗体的产生，局部刺激性小，可以冰冻长期保存而不影响效果。

技术领域

本发明涉及一种疫苗稀释剂及其制备方法和用途，该稀释剂是一种溶液，用它稀释疫苗后注射动物，可促进疫苗诱导的特异性抗体的产生。

背景技术

动物传染病可造成畜禽大量死亡，严重危害养殖业的健康发展，是引起养殖业经济损失的一类重要动物疾病。为减少传染病的发病率和死亡率，需要对动物注射疫苗，使动物产生特异性保护性抗体。但近年来常有报道，动物注射疫苗后体内检测不到足够水平的抗体，无法阻止疾病的发生，给养殖户带来严重的经济损失。例如，王建等人给断奶仔猪注射繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗，70天后用野毒攻毒，保护率仅为63.6％(1)；曹振山等人检测了206 份猪血样中的猪瘟抗体，仅有136份血样达到抗体合格水平，合格率只有66.0％(2)；金立忠和万春艳报道了2017年8月的扶余市在注射疫苗后猪群发生猪瘟的情况(3)。因此，提高疫苗的注射效果，有效预防传染病的发生在养殖业具有重要意义。

目前用于预防动物传染病的疫苗主要有弱毒疫苗和灭活疫苗两大类。冻干弱毒疫苗由于注射后抗体的持续时间长而在养殖业被广泛使用，如猪伪狂犬弱毒疫苗、传染性法氏囊病弱毒冻干疫苗、猪瘟冻干弱毒疫苗、新城疫Ⅳ系弱毒疫苗、鸡新城疫-传染性支气管炎二联弱毒疫苗等。这类疫苗是一种粉末状固体，无法直接给动物接种，需要用稀释液稀释后才能使用。常用的疫苗稀释剂有氢氧化铝铝胶生理盐水溶液和生理盐水。铝胶溶液的缺点是仅仅提高 IgG1的产生而不能促进IgG2a的产生(4,5)、在注射部位局部反应大(6)和冰冻保破坏了胶体结构使其丧失佐剂功能；生理盐水稀释剂无免疫增强作用；也有报道含人参皂甙的水溶稀释弱毒疫苗后免疫动物可以提高疫苗免疫效果(7)。该文中告知：人参皂苷(GSLS)和硫柳汞(TS)对小鼠伪狂犬病毒稀释弱毒疫苗的辅助作用。与单独用小鼠伪狂犬病毒免疫的组相比，人参皂苷和/或硫柳汞的共同接种(人参皂苷6μg/100μL；硫柳汞1μg/100μL)具有较高的抗体免疫效果。且当与GSLS-TS一起施用时，能够增强伪狂犬病毒疫苗的血清特异性抗体(IgG1和IgG2a)。

参考文献：

(1)王建，齐永新，李凯航，葛菲菲，刘佩红，袁世山.三种猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果评价，动物医学进展，2012,33(4)：107-113；

(2)曹振山，陈静，马慧玲，孔祥华，王士荣，孙胜福.山东省2016年猪瘟抗体监测与分析，中国畜禽种业，2017.8,7；

(3)金立忠，万春艳.兔化弱毒苗免疫猪群发生猪瘟的诊断报告，畜牧兽医，2017(7), 246；

(4)John CC and Alan RC.Adjuvants-a classification and review of theirmodes of action. Vaccine,1997:248-256(疫苗佐剂：作用模式和分类.疫苗杂志,1997:248-256)；

(5)HogenEsch H.Mechanisms of stimulation of the immune response byaluminum adjuvants. Vaccine,2002,20:34–39(铝胶座机刺激免疫反应的机制，疫苗杂志,2002,20:34–39)；

(6)Eickhoff,T.C.,Myers,M.Aluminum in vaccine(Conference report).Vaccine 2002,20, S1-S4(疫苗中的铝(会议报告).疫苗杂志，2002,20,S1-S4)；