[发明专利]一种测定羽毛降解率的方法

说明书

本发明公开了一种测定羽毛降解率的方法，属于羽毛降解率检测方法技术领域。该方法为：将尼龙袋烘干至恒重，称量尼龙袋重量，记为M1；将羽毛清洗，烘干后粉碎，过筛获得羽毛粉；称取羽毛粉，置于尼龙袋中，封口后烘干至恒重，称量重量，记为M2；将尼龙袋浸没于液体培养基中，向液体培养基中接种菌液后进行发酵，发酵后将尼龙袋捞出，加入蒸馏水，使蒸馏水浸没尼龙袋，将容器置于水浴摇床中清洗，重复操作多次，将清洗后的尼龙袋烘干后称重，记为M3；按照公式计算羽毛降解率。本发明方法测定羽毛降解率的结果更为准确，并且平行性和重复性较好，操作方法简单，检测效率高。适合于微生物对羽毛降解能力的评定，或用于微生物降解羽毛的研究。

技术领域

本发明涉及一种测定羽毛降解率的方法，属于羽毛降解率检测方法技术领域。

背景技术

羽毛富含角蛋白，是较好的动物性蛋白饲料来源，但角蛋白不易被畜禽消化，利用率降低。因此，在将羽毛饲用之前，需采取方法将羽毛角蛋白降解，生物发酵法是降解羽毛提高其饲用价值的发展方向。但目前还没有统一的检测羽毛降解率的实验方法。目前常用的测定羽毛降解率的实验方法是减重法，但传统的检测方法，将羽毛整根放置于发酵液中，造成发酵过程中，并未被有效降解的断羽分散到了发酵液中，这样再对整根羽毛进行减重法检测羽毛降解率，往往造成测定结果偏高，而且测定的平行性和重复性很差；采用粉碎后的羽毛进行发酵，其羽毛粉在发酵过程中，会粘到发酵器皿上，无法随着发酵液转移到滤纸上，同样造成结果偏高，测定的平行性和重复性也较差。而且以上两种方法采用过滤法时，重力法过滤速度较慢，而真空抽滤法对仪器设备有一定要求，均不利于对羽毛降解率进行高通量测定。

发明内容

为解决现有减重法检测结果不够准确，测定平行性和重复性差，以及测定效率较低的问题，本发明提供了一种测定羽毛降解率的方法，采用的技术方案如下：

本发明的目的在于提供一种测定羽毛降解率的方法，该方法包括如下步骤：

1)将尼龙袋烘干至恒重，称量尼龙袋重量，记为M1；

2)将羽毛清洗，烘干后粉碎，过筛获得羽毛粉；

3)称取羽毛粉，置于步骤1)的尼龙袋中，封口后烘干至恒重，称量重量，记为M2；

4)将尼龙袋完全浸没于液体培养基中，向液体培养基中接种菌液后进行发酵，发酵完成后将尼龙袋捞出，置于容器中，然后加入蒸馏水，使蒸馏水完全浸没尼龙袋，将容器置于水浴摇床中进行清洗，重复操作多次，将清洗后的尼龙袋烘干后称重，记为M3；

5)按照如下公式计算羽毛降解率，羽毛降解率＝[(M2-M3)/(M2-M1)]*100。

优选地，步骤1)所述尼龙袋的孔径为40μm。尼龙袋孔径采用40μm，在该条件下的尼龙袋可以获得最为准确的羽毛降解率测定结果，因为如果孔径太大，后续操作过程中发酵后形成的未被有效降解的固形物会通过尼龙袋的孔目中流出，导致结果不准确；如果孔径太小的话，发酵微生物不易通过尼龙袋孔目进入尼龙袋内部对羽毛粉进行降解，影响发酵效率。

优选地，步骤2)所述过筛是将粉碎后的羽毛先过30目筛，再过40目筛，取40目筛上的粉末，获得羽毛粉。如果筛子孔径过大，羽毛粉不均匀，筛子孔径太小羽毛粉容易飞散，因此先过30目筛，再过40目筛，取40目筛上留存的羽毛粉最为适宜。

优选地，步骤1)所述烘干的温度为105℃；步骤3)所述烘干的的温度为105℃；步骤4)所述烘干的温度为105℃。

优选地，步骤4)所述清洗是在70℃-90℃、100rpm的条件下清洗。

优选地，步骤4)所述清洗的时间为10min。

优选地，步骤4)所述重复操作次数为五次。

优选地，步骤3)所述称取羽毛粉的重量为2g。