[发明专利]一种润肺膏指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

权利要求书

1.一种润肺膏指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：精密称取一定质量的不同批次的润肺膏制剂，置于玻璃容器中，加入一定量溶剂稀释并定容，摇匀，过微孔滤膜，得供试品溶液；

(2)参照物溶液的制备：精密称取一定量的绿原酸标准品，用溶剂溶解后，过微孔滤膜，得参照物溶液；

(3)测定：分别精密吸取供试品和参照物溶液，注入高效液相色谱仪，进行测定，记录色谱图；

(4)润肺膏指纹图谱的构建：将不同批次的润肺膏供试品色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价软件，选择各批次润肺膏色谱图中均存在的色谱峰作为共有的色谱峰，生成润肺膏对照指纹图谱，计算各共有峰的相对峰面积和相对保留时间。

2.根据权利要求1所述的一种润肺膏指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液的制备方法如下：精密称取润肺膏制剂5.0g于烧杯中，加入蒸馏水稀释，之后转移到10mL容量瓶中，加入蒸馏水定容，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取滤液即得供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的一种润肺膏指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(2)中，所述参照物溶液的制备方法如下：精密称取一定量的绿原酸标准品，加入50％甲醇配制绿原酸参照物溶液，浓度为50-100μg/mL，过0.45μm微孔滤膜，滤液即为参照物溶液。

4.根据权利要求1所述的一种润肺膏指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，所述测定为分别精密吸取供试品和参照物溶液20μL，注入高效液相色谱仪，测定并记录50min的色谱图。

5.根据权利要求1所述的一种润肺膏指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，润肺膏指纹图谱测定的色谱条件为：色谱柱为慧德易SP ODS-A柱(5μm，4.6×250mm)；检测波长为254nm；流速为1.0mL/min；柱温为25℃；进样量为20μL；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸水溶液，采用梯度洗脱的方式；流动相梯度为：0～10min，5％A，95％B；10～20min，5％-8％A，95-92％B；20～30min，8％-12％A，92-88％B；30～50min，12％-18％A，88-82％B。

6.根据权利要求1所述的一种润肺膏指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(4)中，所述建立方法得到的指纹图谱中含有10个特征峰，其中10号峰为对照品绿原酸，各峰以10号峰为参照峰的相对保留时间和相对峰面积如下：相对保留时间：峰1：0.251～0.255；峰2：0.360～0.363；峰3：0.382～0.388；峰4：0.434～0.441；峰5：0.517～0.519；峰6：0.549～0.556；峰7：0.566～0.580；峰8：0.600～0.606；峰9：0.623～0.627；峰10：1.000；相对峰面积：峰1：4.3576～5.1133；峰2：1.3582～1.7955；峰3：26.5149～35.4553；峰4：2.1450～2.5839；峰5：2.5258～3.1187；峰6：0.4975～0.5665；峰7：1.2079～1.3804；峰8：2.0684～2.3946；峰9：2.3285～2.4911；峰10：1.0000。