[发明专利]一种检测树鼩腺病毒的实时荧光定量PCR引物、探针和试剂盒

权利要求书

1.一种检测树鼩腺病毒的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，含有PCR引物和配合使用的探针，所述PCR引物的核苷酸序列为：

上游引物：5′-AAAGAATGCCCACCTCCCAT-3′，

下游引物：5′-CAGTGGCAGGCCATTAAGC-3′，

所述探针的核苷酸序列为：

5′-Fam–CTCGCCGCCGCCGGTTTCAC-Tamra-3′。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括：标准阳性模板、阴性对照模板和实时荧光定量PCR反应液；

所述的标准阳性模板是含有阳性TAV特异性保守序列的PUC57 载体质粒；

所述的阴性对照模板为从树鼩分离出的不同于树鼩腺病毒的其它病毒。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的阴性对照模板为树鼩呼肠孤病毒。

4.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括空白对照模板，所述的空白对照模板为灭菌的双蒸水。

5.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的实时荧光定量PCR 反应液包括2×iTaq^TM Universal Probes One-Step Reaction Mix和Easy Dilution。

6.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，其工作反应体系为：

模板 3μL，

上游引物10μM 1μL，

下游引物10μM 1μL，

探针 10μM 2μL，

2×iTaq^TM Universal Probes One-Step Reaction Mix 10μL，

Easy Dilution 3μL，

总计20μL。

7.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，其工作程序为：95℃预变性2min，95℃变性10s，58℃退火30s，共40个循环。

8.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，标准阳性模板的质粒拷贝数为1×10⁷copies/μL。