[发明专利]一种基于便携式智能手机显微镜的颗粒计数器及计算方法

权利要求书

1.一种基于便携式智能手机显微镜的颗粒计数器的计算方法，其特征在于，该计数器包括智能手机、安装在智能手机上的PDMS透镜以及手机支架，其中，PDMS透镜的制备方法包括如下步骤：

步骤一：将PDMS单体和固化剂按照10:1的比例进行混合，制成厚度为3mm的PDMS块，将PDMS块进行去除气泡处理，再固化1小时；

步骤二：使用圆形穿孔机，将PDMS块分别制备成直径为2mm、3mm以及4mm尺寸的圆柱形PDMS柱，将PDMS柱放在载玻片上，使用疏水性全氟硅烷通过化学气相沉积法来进行处理，沉积2小时，使PDMS柱表面疏水性；

步骤三：将PDMS单体和固化剂按照10:1的比例进行混合，脱气以去除气泡，并放置到烘箱内，在40℃条件下，预固化1小时，然后转移到50微升的带针头注射器内，将混合的PDMS从注射器以不同体积容量注入到步骤二制备的PDMS柱表面上，即得到PDMS透镜；

计算方法包括如下步骤：

步骤1：智能手机储存单行像素行的像素强度，并对经过的所有颗粒进行计数，提起每帧的ROI的像素行，将所有行合并成一个图像，按帧顺序排列在Y轴中，即合并图像中的第一行像素来自第一帧，第二行来自第二帧，依此类推，然后把合并的图像进行斑点检测；

步骤2：合并的图像包含有关颗粒在通过R0I时的位置信息，以及颗粒通过R0I的时间，在灰度的转换过程中，颗粒的延伸会丢失，将其作为选择标准进行排除；

步骤3：通过优化视频斑点检测的主要控制参数，包括最小像素阀值和最大像素阀值，检测到斑点的最大面积和最小重复性，像素阀值是斑点检测中的参数，阀值使得函数能够区分候选颗粒和背景像素，最小像素阀值和最大像素阀值将斑点进行区分，最小重复性用于区分彼此接近的斑点，用于排除阀值内不是颗粒的较大像素集合，在最大斑点面积区域内确定允许检测的最大尺寸颗粒候选区；步骤2中，微流体装置的背景明亮且具有较高的平均像素值，而颗粒较暗，具有较低的像素值，只有一行像素被选为R0I，且是在合并图像中捕获的位移部分颗粒，合并的图像不包含任何有关颗粒的形状和凹度的信息，只有颗粒存在的信息。

2.根据权利要求1所述的一种基于便携式智能手机显微镜的颗粒计数器的计算方法,其特征在于，步骤1中，通过合并的图像需要通过组合所有三原色颜色通道转换成8位灰度图像来执行斑点分析，8位灰度图像是单个通道图像。