[发明专利]一种用于显微观察的样品支持装置有效

专利信息
申请号: 201810208629.3 申请日: 2018-03-14
公开(公告)号: CN108593549B 公开(公告)日: 2020-07-28
发明(设计)人: 周芳;肖媛;左艳霞;汪艳;乔志仙;崔宗斌 申请(专利权)人: 中国科学院水生生物研究所
主分类号: G01N21/01 分类号: G01N21/01
代理公司: 武汉惠创知识产权代理事务所(普通合伙) 42243 代理人: 陈薇
地址: 430072 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 显微 观察 样品 支持 装置
【说明书】:

发明涉及一种用于显微观察的样品支持装置,包括皿体和样品支持管,所述皿体的侧壁上设置有两个通孔,所述样品支持管通过所述两个通孔贯穿所述皿体并在所述皿体侧壁外露出头部和尾部,所述样品支持管与所述通孔的连接为水密性连接,并且使所述样品支持管可绕自身的中心轴转动,所述样品支持管的两端开放,并且设置有可拆卸的塞子,所述头部的端部设置有移液器连接部。使用本发明的样品支持装置可方便快捷地制样,免除了移除制样后还需要修整凝胶块的复杂工作,并且制样后可根据实验人员的需要转动样品支持管,方便地将样品的体姿调整到观察最优状态。不会因为样品体姿不对而导致重新制样。

技术领域

本发明涉及显微观察用的实验器材领域,更特别地,涉及一种用于显微观察的样品支持装置。

背景技术

生物的活体神经动态成像是神经学研究的重要手段,而该成像过程要求成像系统具有细胞水平的分辨率以及足够高的成像速率。光片照明显微镜自2004年至今,发展非常迅速,已经在胚胎发育研究及神经研究方面取得了突出成果,已经逐渐成为了一种科学成像的重要手段。光片照明显微成像技术使用一层光速薄片从样品侧面激发荧光,在垂直于光片的方向通过显微物镜与CCD或sCOMS来获取照明层面的荧光图像,从而实现了荧光样品的三维层析成像。与共聚焦成像技术相比,光片照明显微成像采用了面探测的成像方式取代传统的点扫描成像方式,因此它具有更高的成像速率,更高的信噪比以及更低的光漂白光毒性效应,适用于数小时甚至数天的活体生物成像。

目前市面上有多个厂家推出的光片照明显微镜,其中Leica公司通过研制出TwinFlect反光镜,将光片系统搭载在共聚焦平台上,独特的TwinFlect反光镜装置使照明光片偏转90度,从而将照明和检测光路集成到每台倒置Leica TCS SP8的纵向轴中,同时又不牺牲共聚焦功能,将共聚焦平台变为简单易用的多功能光片显微镜。Leica公司的光片系统同样对样品进行单平面照明,非常适合敏感样品和快速生物过程的成像。由于不存在离焦激发,可将光毒性的影响局限于焦平面上。将待观察的样品固定后置于TwinFlect反光镜的两个镜片中间,并在光片下移动样品,从而实现样品3D成像。

不同厂家的光片照明显微镜尽管原理一样,但由于硬件组件不同,制样方法也截然不同。Leica公司光片系统在观察斑马鱼等小型实验动物样品时,一般将这样的实验动物样品固定在玻璃底Petri观察皿中,并且样品两侧留有空间以使样品可置于两个镜片中间。

目前,小型实验动物样品的制样方法如下:首先在Petri培养皿底部铺一层1%的琼脂糖层作为垫层,然后在垫层上方加入0.5%的低熔点琼脂糖并加入样品,使样品保持特定的姿态等待低熔点琼脂糖凝固,形成样品固定层。然后将样品两侧的琼脂糖凝胶清除,以使固定好的样品可放置在TwinFlect反光镜的两个镜片中间。最后,向观察皿中加入水直至可浸没TwinFlect反光镜的镜片。

由于TwinFlect反光镜的设置,必须使光平面与实验样品的矢状面完全平行。而TwinFlect反光镜的镜片角度是不可调的,这就使得对样品的体姿要求十分苛刻(即,矢状面保持水平),只要样品固定时有些微角度的偏移,所得到的固定样品就无法用于共聚焦扫描,必须重新制样。然而,该仪器可观察的动物样品都是斑马鱼等小样品,在上机之前很难判断其矢状面是否水平。

此外,由于在制备过程中需要清除样品两侧的琼脂糖凝胶,琼脂糖凝胶与平皿底部的接触面积比较小,所述在加入向观察皿中加水时,包裹着样品琼脂糖凝胶有可能被冲走或漂浮起来。

制样难度带来的缺陷极大限制了该装置用于观察动物样品的用途,使得该装置得不到充分的利用。

因此,需要一种新的样品支持装置使制样更为简便。

发明内容

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