[发明专利]一种小鼠嗜酸性粒细胞食管炎食物过敏模型的建立方法

说明书

本发明提供了一种小鼠嗜酸性粒细胞食管炎食物过敏模型的建立方法及应用，本发明采用花生蛋白经口致敏和花生蛋白接触皮肤致敏两种方式加强嗜酸性粒细胞的活化和聚集，建立了小鼠嗜酸性粒细胞食管炎食物过敏模型。通过利用本发明建立的动物模型，本发明还发现鹌鹑蛋灌胃治疗能在治疗期间引起模型组对鹌鹑蛋的免疫反应，对花生蛋白特异性IgE及IgG1都表现出抑制作用，可以降低花生蛋白特异性IgE及IgG1抗体水平，抑制TH2细胞的极化，治疗类EOE样食物过敏反应。本发明为研究和治疗嗜酸性粒细胞食管炎提供了动物模型和便捷的方法。

技术领域

本发明涉及免疫学与动物医学模型应用领域，特别是涉及一种小鼠嗜酸性粒细胞食管炎食物过敏模型的建立方法及该模型在研究抗过敏剂对于过敏病症治疗中的作用。

背景技术

嗜酸性粒细胞食管炎(Eosinophilic esophagitis，又称EoE)是一种迟发型食物过敏反应，在西方国家人群中，发病率从每100,000人的10人上升到50人。亚洲已报道的关于EoE疾病的研究相对较少，但有学者发现EoE疾病在亚洲的发病率与西方国家相似。对于许多患者甚至是医生来说，EoE属于一种食物过敏的概念都是陌生的，因为EoE没有表现出过敏疾病典型的症状，如荨麻疹，肿胀，瘙痒，哮喘或过敏性休克。相反，它会引起食道功能障碍，如吞咽困难，食物阻塞，呕吐和疼痛。

美国国家过敏和传染病研究所专家小组将食物过敏定义为由于反复暴露于某种特定食物而发生的不利于健康的特异性免疫反应。一些研究表明EoE作为一种无法消退的食道炎症状态，避免与特定食物过敏原接触能够阻止该疾病的发生，而重复接触特定食物过敏原会导致疾病复发，因此，食物过敏原对EoE疾病的发生至关重要。

嗜酸性粒细胞在EoE发病中发挥关键作用。尤其是在组织、血液和骨髓中升高的嗜酸性粒细胞数量是EoE的标志之一，并且与疾病严重程度相关，这表明嗜酸性粒细胞是EoE的病理生理学中许多关键效应细胞之一。在EoE过敏疾病中，嗜酸性粒细胞的激活能促进各种介质的分泌，包括细胞因子如IL-4、IL-5、IL-13，转化生长因子(TGF)-β，趋化因子如CCL5、RANTES和CCL11/嗜酸性粒细胞趋化因子-1，和脂质介质如白三烯C4。这些介质对炎症反应具有深远的影响，包括上调粘附分子，增强细胞运输和激活，以及调节血管通透性和肌肉收缩。此外，嗜酸性粒细胞分泌毒性颗粒蛋白，其损害肠道上皮细胞，包括嗜酸性粒细胞过氧化物酶、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白、嗜酸性粒细胞衍生神经毒素和主要碱性蛋白，所有这些在EoE病人的组织都显示有明显地增加，促进组织损伤与功能障碍。

目前，由蛋白引发的EoE疾病较为常见，而评价蛋白致敏性最直接的方法是建立一种动物模型。动物模型在了解食物过敏反应发生和发展过程中所包含的复杂的免疫学及病理生理学机制等方面有极高的研究价值，动物模型还可用于研究抗过敏剂对于过敏病症的缓解作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种小鼠嗜酸性粒细胞食管炎食物过敏模型的建立方法。

本发明的另一目的在于提供鹌鹑蛋在抗过敏中的应用。

本发明首先提供一种小鼠嗜酸性粒细胞食管炎食物过敏模型的建立方法，通过经口诱导和经皮肤诱导两种方式联合诱导来建立小鼠嗜酸性粒细胞食管炎食物过敏模型。

所述经口诱导为：选BALB/c小鼠，在实验第0，7和14天分别经腹腔注射50-200μL致敏剂；实验第29-49天，小鼠每隔一天用100-300μL PBS灌胃刺激，所述PBS中溶有1-3μg/μL花生蛋白。

优选地，在实验第0，7和14天分别经腹腔注射100μL致敏剂；实验第29-49天，小鼠每隔一天用200μL PBS灌胃刺激，所述PBS中溶有2μg/μL花生蛋白。

所述BALB/c小鼠为7至8周龄雌性BALB/c小鼠。

所述致敏剂为含1-3μg/μL的花生蛋白和10-30μg/μL氢氧化铝凝胶的PBS溶液。