[发明专利]一种用于甲型流感病毒检测及H1和H3分型的多重RT-RPA引物组合及其应用有效
申请号: | 201810202381.X | 申请日: | 2018-03-13 |
公开(公告)号: | CN108192996B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 李晓军;孙宁;王卫萍;姚新月;陈芳芳;杨阳;王洁 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军南京军区南京总医院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 施婷婷 |
地址: | 210002 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 流感病毒 检测 h1 h3 多重 rt rpa 引物 组合 及其 应用 | ||
1.一种用于甲型流感病毒检测及H1和H3分型的多重RT-RPA引物组合,其特征在于,所述多重RT-RPA引物组合包括用于检测甲型流感病毒Matrix基因的RT-RPA引物,其正向引物序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物序列如SEQ ID NO.2所示;用于检测甲型流感病毒H1亚型HA基因的RT-RPA引物,其正向引物序列如SEQ ID NO.3所示,反向引物序列如SEQ IDNO.4所示;用于检测甲型流感病毒H3亚型HA基因的RT-RPA引物,正向引物序列如SEQ IDNO.5所示,反向引物序列如SEQ ID NO.6所示。
2.如权利要求1所述的一种用于甲型流感病毒检测及H1和H3分型的多重RT-RPA引物组合,其特征在于,所述多重RT-RPA引物组合的各引物浓度均为10μM;甲型流感病毒Matrix基因、H1亚型和H3亚型HA基因经RT-RPA扩增的产物序列分别如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示。
3.含有权利要求1所述的一种用于甲型流感病毒检测及H1和H3分型的多重RT-RPA引物组合的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒用于甲型流感病毒检测及H1和H3分型,试剂盒包括权利要求1所述的多重RT-RPA引物组合。
4.如权利要求3所述的检测试剂盒,所述试剂盒还包括如下组分:缓冲液、酶反应液、无RNase水、反转录酶、RNase抑制剂、醋酸镁溶液、阴性对照和阳性对照;所述阳性对照为1.0×105copies/μL的体外合成单链RNA标准品;阴性对照为灭活的正常人咽拭子。
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