[发明专利]一种胶体硒标记的抗HE4抗体、试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种胶体硒标记的抗HE4抗体、试剂盒及其制备方法。该胶体硒标记的抗HE4抗体，含有胶体硒粒子和与胶体硒粒子结合的抗HE4抗体。本发明提供的胶体硒标记的抗HE4抗体，采用胶体硒粒子和抗HE4抗体结合作为HE4检测用的显色标记抗体，其成本约为胶体金的1/27，可大大降低HE4显色标记抗体的成本，从而能够更方便的应用于卵巢癌肿瘤标志物的日常筛查中。试验表明，基于该胶体硒标记的抗HE4抗体的试剂盒的稳定性好、灵敏快速、结果易判、可靠性强，能够满足HE4的快速筛查需求。

技术领域

本发明属于生物学免疫层析检测方法领域，具体涉及一种胶体硒标记的抗HE4抗体、试剂盒及其制备方法。

背景技术

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于宫颈癌和宫体癌，但是死亡率却居于第一位。在欧美等地区卵巢癌发病率高达十万分之十五，在我国发病率也高达十万分之五并且每年约有25％的患者死亡。近年来我国卵巢癌发病率和死亡率均呈逐年上升趋势，严重危害女性健康。卵巢癌因其早期临床症状不明显且与卵巢良性肿瘤又很难区分，目前缺乏早期诊断的有效方法，极易造成漏诊与误诊，将近七成的卵巢癌患者在确诊时，已处于癌症晚期并已扩散到其他器官，往往错过最佳治疗阶段，卵巢癌也因此被称为威胁女性健康的“沉默杀手”。在已经确诊的卵巢癌患者中，Ⅰ期卵巢癌患者的5年生存率为90％，而晚期卵巢癌患者仅为30％。因此，如能早期检出卵巢癌，可大大减少死亡率，延长患者生存时间。

目前，卵巢癌临床常用的诊断方法有：1、妇科三合诊；2、彩色B超；3、CT、MRI、PET等；4、肿瘤标志物的检测；尽管这些方法应用较为广泛，但是这些方法普遍存在价格昂贵，操作复杂，需要大型仪器设备且检测结果需要具有丰富临床经验积累的医师进行解读；另一方面，检测结果不能对肿块的良恶性做出准确的判断。与此相比，血清肿瘤标志物在肿瘤较小时就能被检测到，在卵巢癌的早期筛查、临床诊断、疗效评估、病情监测及预后判断等方面有较好的临床应用价值。

肿瘤标志物CA125被视为卵巢癌诊断的“金标准”，然而由于CA125的特异性及敏感度较低，容易出现假阴性或假阳性造成患者的漏诊或误诊，目前需要开发一种更好的标志物以尽早诊断卵巢癌。人附睾蛋白4(HE4)属于乳清酸性4-二硫化中心(WFDC)蛋白家族，具有疑似胰蛋白酶抑制剂的特性，它是一种新的卵巢癌血清标志物。正常生理情况下，HE4在人体中有非常低水平的表达，但在卵巢癌组织和患者血清中均高度表达，疾病早期HE4诊断的敏感度是82.7％，而CA125却仅有45.9％；与CA125仅20％的特异性相比，HE4的特异性高达99％，其对早期卵巢癌的敏感性和特异性均优于CA125，因此可用于卵巢癌的早期诊断、鉴别、治疗监测及预后评估。

公布号为CN106198983A的专利申请公开了一种用于卵巢癌检测的试剂盒，该试剂盒是利用免疫层析方法进行检测，试剂盒的结合垫上包被有显色标记的抗HE4抗体。对于抗HE4抗体的标记目前多采用胶体金，其制备工艺、检测效果能够满足一般的检测要求，但其成本较高，并不适用于早期卵巢癌的日常床旁快速筛查诊断和家庭自检。

发明内容

本发明的目的在于提供一种胶体硒标记的抗HE4抗体，从而解决胶体金标记的抗HE4抗体的成本较高的问题。本发明还提供了一种基于上述胶体硒标记的抗HE4抗体的试剂盒及制备方法。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种胶体硒标记的抗HE4抗体，含有胶体硒粒子和与胶体硒粒子结合的抗HE4抗体。

所述胶体硒粒子为胶体硒溶液中的胶体粒子，所述胶体硒溶液由亚硒酸、维生素C、模板剂在水中反应制成。

本发明提供的胶体硒标记的抗HE4抗体，采用胶体硒粒子和抗HE4抗体结合作为HE4检测用的显色标记抗体，其成本约为胶体金的1/27，可大大降低HE4显色标记抗体的成本，从而能够更方便的应用于卵巢癌肿瘤标志物的日常筛查中。试验表明，基于该胶体硒标记的抗HE4抗体的试剂盒的稳定性好、灵敏快速、结果易判、可靠性强，能够满足HE4的快速筛查需求。