[发明专利]一种RCAN1适配子RCAN1-s14

说明书

本发明涉及生物医学领域，具体涉及一种RNA适配子RCAN1‑s14以及其在制备RCAN1蛋白靶向抑制剂药物中的用途。本发明通过蛋白印迹和RNA敏感性实验技术分析证实，RCAN1可以与RNA相互结合，并筛选出特异性RCAN1适配子RCAN1‑S14。此外，本发明证实RCAN1‑S14可以通过与RCAN1结合可以减弱RCAN1相关生物学功能，从而可用于制备治疗与RCAN1相关疾病的靶向药物。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体涉及一种小分子RNA适配体RCAN1-s14以及其在在制备RCAN1蛋白靶向抑制剂药物中的用途。

技术背景

钙调磷酸酶调节因子(the regulator of Calcineurin 1，RCAN1)位于21号染色体的唐氏综合症关键区域(Down Syndrome Critical Region,DSCR)，因此之前又被称作唐氏综合症关键域蛋白1(Down Syndrome Critical Region 1,DSCR1)。根据起始编码RCAN1蛋白的外显子不同，RCAN1又细分为RCAN1.1和RCAN1.4。RCAN1.1又含有RCAN1.1S和RCAN1.1L两种转录产物。RCAN1的主要功能是通过与神经钙调蛋白钙依赖磷酸酶(calcineurin)相互作用，从而抑制钙依赖磷酸酶的活性及钙依赖磷酸酶-NFAT信号通路。相反地，RCAN1也能被钙依赖磷酸酶-NFAT信号通路激活，因此RCAN1的基因调控形成了负反馈调节。这种紧张有序的RCAN1负反馈调节也预示着RCAN1在细胞功能及相关疾病的发生和发展过程中的重要作用。

研究发现，RCAN1在细胞凋亡，应激，记忆和分化等生理过程中有非常重要的调节作用。钙依赖磷酸酶(Calcineruin)是一个钙离子依赖的丝氨酸/苏氨酸蛋白膦酸酯酶，参与钙信号通路的细胞反应，在细胞信号应激和环境刺激中可以调节细胞的凋亡和记忆过程，也能介导骨骼肌和心肌的发展和分化。研究发现未磷酸化状态下RCAN1基因的蛋白产物calcipressin 1能与钙依赖磷酸酶的催化亚基结合并抑制钙依赖磷酸酶的催化活性，RCAN1便成为了钙依赖磷酸酶内源性抑制剂。然而当RCAN1被糖原合成激酶3(glycogensynthase kinase 3,GSK-3)磷酸化后，与钙依赖磷酸酶分离并降解，随后钙依赖磷酸酶被激活。NFATC1(activated T-cell transcription factor 1)作为钙依赖磷酸酶的作用底物被脱磷酸化后入核，激活了RCAN1的转录。因此，RCAN1与钙依赖磷酸酶/钙依赖磷酸酶-NFAT之间存在负反馈调节机制。此外，RCAN1也同样参与了NF-B信号通路。在人类胚胎大脑的研究中发现，RCAN1可以被NF-B诱导激酶NIK(NF-B-inducing kinase)特异性结合并磷酸化，RCAN1蛋白稳定性增加，可溶性和非可溶性的RCAN1含量增加，而可溶性蛋白的增加导致了细胞毒性物质的形成。之前的研究也发现RCAN1.4可以提高IκBα的稳定性，抑制NF-B介导的环氧化酶2(cyclooxygenase-2，COX-2)的合成，起到一定的抗炎作用。