[发明专利]一种人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白及其应用

说明书

本发明涉及一种人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白及其应用，通过将大量癌症患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的异分支酸合成酶结构域蛋白2的突变蛋白，根据该人的异分支酸合成酶结构域蛋白2的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为癌症的基因诊断提供指引作用，并为实现癌症的诊断和治疗提供理论基础。

技术领域

本发明涉及一种基因工程领域，尤其涉及一种人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白及其应用。

背景技术

异分支酸合成酶控制着分支酸到异分支酸衍生的各种产物的分配。异分支酸合成酶与癌症的发生密切相关。人的异分支酸合成酶发生突变会对人类健康造成不良影响。在对某些癌症，包括肺癌、肝癌和白血病患者的外周血进行基因测序的过程中，均发现患者的异分支酸合成酶结构域蛋白2发生了突变，因此，对人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变的检测对判断人体是否患有癌症具有一定的指引作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白及其应用。

本发明技术方案包括：

第一方面，提供一种人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

第二方面，提供一种人的异分支酸合成酶结构域蛋白2的突变蛋白的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一种基因芯片，包括：固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针；所述核苷酸探针根据所述人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白的核苷酸序列，与人的异分支酸合成酶结构域蛋白2正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。

优选地，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列。

第四方面，提供一种特异性识别人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白的单克隆抗体，其编码的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示。

第五方面，提供一种用于检测人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括：包被有上述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的异分支酸合成酶结构域蛋白2、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。

优选地，所述酶标二抗为稀释的HRP辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG。

第六方面，提供一种基于上述任一所述ELISA试剂盒检测人的异分支酸合成酶结构域蛋白2突变蛋白的抗体的方法，包括：

a、使用所述包被缓冲液对上述单克隆抗体进行稀释，并将稀释后的所述单克隆抗体加样至ELISA酶标板的孔中，室温孵育；

b、使用所述样品稀释液将检测对象的异分支酸合成酶结构域蛋白2稀释成不同浓度梯度，并将不同浓度梯度的异分支酸合成酶结构域蛋白2分别加样至ELISA酶标板的孔中，室温孵育；

c、甩去各孔中的液体，加入所述ELISA酶标板洗涤液，洗涤并甩干；

d、加入所述酶标二抗，并室温孵育；

e、甩去各孔中的液体，加入所述ELISA酶标板洗涤液，洗涤并甩干；

f、加入所述显色液，室温避光孵育，并加入所述终止液终止反应；

g、在酶标仪上测定波长为450nm处的吸光值。

优选地，进一步包括：空白对照实验。