[发明专利]一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治西瓜枯萎病中的应用

说明书

本发明公开了一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治西瓜枯萎病中的应用。本发明的菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株XT1‑3，是从山东省泰安市东平湖湖泥中分离获得的，已于2017年9月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.14746。试验结果表明：贝莱斯芽孢杆菌菌株XT1‑3生物防治制剂防治西瓜枯萎病病效果显著，防治效果达到77.03％，且西瓜生长健壮，无药害产生。

技术领域

本发明属于植物病害生物防治技术领域。具体而言，本发明涉及一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治西瓜枯萎病中的应用，以及采用该贝莱斯芽孢杆菌制备的生物防治制剂。

背景技术

西瓜在世界园艺业中始终占有重要地位，中国的西瓜种植面积约占世界总面积的55％，总产量约占70％以上。近年来，由于西瓜种植面积不断扩大，造成轮作困难，致使以西瓜枯萎病等为代表的病害也逐年加重。西瓜枯萎病是由西瓜专化型尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum f.sp.niveum)引起的毁灭性土传病害，分布于世界各西瓜产区。西瓜枯萎病是一种维管束病害，在整个生长期均可发生，以开花坐果期和果实膨大期为发病高峰。由于病原菌能进人植株体内繁殖而且潜伏期长，长久以来该病害难以防治，尤其在西瓜重茬栽培情况下，病害发生更为严重。

对于西瓜枯萎病的防治，目前生产上主要依靠化学农药进行防治。高毒农药的使用使该病原菌产生了严重的抗药性，一般的化学防治已不能解决问题，反而给土壤环境带来不良影响。因此研制开发新型高效环境友好型的生物制剂很有必要。

芽孢杆菌是一类好氧或兼性厌氧的产芽孢革兰氏阳性杆菌的总称，其生理特征丰富多样，在自然界中广泛存在，是土壤和植物体表根际的重要微生物种群，对人畜无毒无害，不污染环境，能产生多种抗菌素和酶，具有广谱抗菌活性。芽孢杆菌作为生防菌防治植物病害的机制主要有：抗生作用、营养竞争、空间竞争、重寄生作用以及诱导植物产生抗性等机制，其主要的生防机制是以产生拮抗物质抑制有害病菌的生长或杀死病原菌。这些物质绝大多数为肽类抗生素，具有高效、低残留、与环境友好等优点。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于高效防治西瓜枯萎病的新的微生物——贝莱斯芽孢杆菌菌株XT1-3。本发明的贝莱斯芽孢杆菌菌株具有生长速度快、产孢量大、抗逆性强，在植物(西瓜)表面能够快速大量定殖等特点，因此具有良好的应用前景。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：本发明所提供的菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株XT1-3，是从山东省泰安市东平湖湖泥中分离获得的，已于2017年9月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏号为CGMCCNo.14746。其具有以下生物学特性：在牛肉膏培养基上菌落呈乳白色、黏液性、皱褶状凸起，镜检，菌体细胞呈杆状，能运动；经革兰氏染色呈阳性(以大肠杆菌为对照)；经芽孢染色后观察芽孢呈椭圆形或柱状。

本发明贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)菌株XT1-3的培养方法或繁殖方法包括：

(1)普通培养保存采用牛肉膏培养基，配方为：牛肉浸膏3g，葡萄糖2.5g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH调至7.2～7.4。

(2)实验室液体培养采用牛肉膏液体培养基，配方为：牛肉浸膏3g，葡萄糖2.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH调至7.2～7.4。

(3)固体培养基配方：固料和无机盐，所述固料和无机盐的质量比为98.5∶0.5；所述固料按质量比计为玉米粉∶豆粕粉∶麸皮＝65∶25∶10；所述无机盐的组分及重量比为：磷酸二氢钾15％，硫酸镁5％，硫酸铵15％，轻质碳酸钙65％。

(4)大量发酵培养配方：同(3)中固体培养基配方。