[发明专利]一种耐高浓度木质纤维素预处理副产物的β-葡萄糖苷酶高通量筛选方法在审
| 申请号： | 201810172803.3 | 申请日： | 2018-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN108396055A | 公开（公告）日： | 2018-08-14 |
| 发明（设计）人： | 赵喜华;李汉昕;易拾 | 申请（专利权）人： | 江西师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/34 | 分类号： | C12Q1/34 |
| 代理公司： | 南昌华成联合知识产权代理事务所(普通合伙) 36126 | 代理人： | 黄晶 |
| 地址： | 330000 *** | 国省代码： | 江西;36 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 预处理 木质纤维素 葡萄糖苷酶 副产物 高通量筛选 平板培养基 枸橼酸铁铵 七叶苷 光圈 乙酸 木质素衍生物 阳性克隆子 羟甲基糠醛 定向进化 分泌表达 生物能源 乙酰丙酸 突变酶 甲酸 糠醛 制药 生长 应用 生产 | ||
1.一种耐高浓度木质纤维素预处理副产物的β-葡萄糖苷酶高通量筛选方法，其特征在于，采用显色化合物平板培养基进行高通量筛选耐木质纤维素预处理副产物的β-葡萄糖苷酶，具体包括以下步骤：
(1)将β-葡萄糖苷酶于含有七叶苷和枸橼酸铁铵的平板培养基上进行分泌表达；
(2)挑取阳性克隆子于普通平板培养基上生长；
(3)再将七叶苷溶液、枸橼酸铁铵溶液和含有木质纤维素预处理副产物的溶液加入到长有阳性克隆子的普通平板培养基上，于一定温度下反应1-2h，获得能产生黑色光圈的突变酶。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述的含有七叶苷和枸橼酸铁铵的平板培养基中，七叶苷浓度为0.05-0.25％，枸橼酸铁铵浓度为0.2-3％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)所述的七叶苷溶液的浓度为0.05-0.25％，枸橼酸铁铵浓度为1-2％。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)所述的木质纤维素预处理副产物包括糠醛、5-羟甲基糠醛、甲酸、乙酸、乙酰丙酸、木质素衍生物、盐。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤(3)所述的含有木质纤维素预处理副产物的溶液中，糠醛的浓度为5-50mg/mL、5-羟甲基糠醛的浓度为0-80mg/mL、甲酸的浓度为0-25mg/mL、乙酸的浓度为0-50mg/mL、乙酰丙酸的浓度为20-60mg/mL、木质素衍生物的浓度为5-30mg/mL、盐的浓度为0-80mg/mL。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述的盐包括甲酸盐、乙酸盐和乙酰丙酸盐。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江西师范大学，未经江西师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810172803.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
