[发明专利]发酵生产长链二元酸的方法及其得到的长链二元酸

权利要求书

1.一种发酵生产长链二元酸的方法，其特征在于：所述发酵在以下条件下进行：所述发酵的温度为28～32℃，所述发酵的风量为0.3～0.7vvm，所述发酵的压力为0.05～0.14MPa，所述发酵的菌体生长期的pH为3.0以上，优选3.5～6.5，所述发酵的转化期的pH为7.0以下，优选4.0～6.8，更优选5.0～6.5。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：在所述发酵过程中，当稀释30倍后的菌体光密度OD₆₂₀为0.5以上时，控制所述发酵体系的pH为7.0以下，优选4.0～6.8，更优选为5.0～6.5。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述发酵的菌种包括：热带假丝酵母(Candida Tropicalis)或清酒假丝酵母(Candidasake)。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述发酵的培养基包括：碳源、氮源、无机盐和营养盐；其中，所述碳源包括：葡萄糖、蔗糖和麦芽糖中的一种或多种；所述碳源的添加量优选1％～10％(w/v)；所述氮源包括：蛋白胨、酵母膏、玉米浆、硫酸铵、尿素和硝酸钾中的一种或多种；所述氮源的总添加量优选0.1％～3％(w/v)；所述无机盐包括：磷酸二氢钾、氯化钾、硫酸镁、氯化钙、氯化铁、硫酸铜中的一种或多种；所述无机盐的总添加量优选0.1％～1.5％(w/v)；所述营养因子包括：维生素B1、维生素B2，维生素C、生物素中的一种或多种；所述营养因子的总添加量优选0～1％(w/v)。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述发酵培养基优选包括以下成分：葡萄糖1％～5％、玉米浆0.1％～0.9％、酵母膏0.1％～0.5％、硝酸钾0.05％～1.2％、磷酸二氢钾0.05％～1.0％、尿素0.05％～0.3％、硫酸铵0.05％～0.3％以及氯化钠0.05％～0.2％(w/v)；

或者所述发酵培养基优选包括以下成分：葡萄糖1％～5％、硝酸钾0.05％～0.6％、磷酸二氢钾0.02％～0.6％、硫酸铵0.05％～0.3％以及硫酸镁0.05％～0.3％(w/v)。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述发酵的底物包括烷烃，优选C9～C22的正烷烃，更优选包括C9～C18的正烷烃，最优选包括C10、C11、C12、C13、C14、C15或C16的正烷烃。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述长链二元酸包括C9～C22的长链二元酸，优选包括C9～C18的长链二元酸，更有选包括癸二酸、十一碳二元酸、十二碳二元酸、十三碳二元酸、十四碳二元酸、十五碳二元酸、十六碳二元酸中的一种或多种。

8.一种长链二元酸的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)按照如权利要求1～7任一项所述的发酵生产长链二元酸的方法，得到长链二元酸发酵液；

(2)步骤(1)得到的发酵液酸化，分离得固形物，再将固形物溶解在有机溶剂中，分离得清液，结晶，得长链二元酸产品。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述酸化的pH优选2.5～5，更优选3～4；

和/或，所述分离的方法为离心或过滤；

和/或，所述有机溶剂包括：醇、酸、酮类和酯的一种多种；其中，所述醇包括甲醇、乙醇、异丙醇和正丁醇中的一种或多种；所述酸包括乙酸；所述酮包括丙酮；所述酯包括乙酸乙酯和/或乙酸丁酯；

和/或，所述溶解在有机溶剂后，脱色，再分离得清液；所述脱色的方法优选活性炭脱色；所述活性炭的添加量为不超过清液体积5％；所述脱色的温度为85～100℃；所述脱色的时间为15～165min；

和/或，所述结晶为降温结晶；所述降温结晶包括以下步骤：降温至65～80℃，保温1～2小时后，再降温至25～35℃，结晶；

和/或，所述结晶后，分离，得二元酸产品；所述分离的方法为离心分离。

10.如权利要求8或9所述的制备方法制得的长链二元酸。