[发明专利]一种稳定、灵敏的四型胶原蛋白(IV-C)检测试剂有效
| 申请号: | 201810169080.1 | 申请日: | 2018-02-28 |
| 公开(公告)号: | CN108490187B | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
| 发明(设计)人: | 李志明;胡晓飞;王美丽;段洪东 | 申请(专利权)人: | 山东博科生物产业有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N35/00 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 250200 山东省济南市章丘区明水*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 稳定 灵敏 胶原 蛋白 iv 检测 试剂 | ||
1.一种稳定、灵敏的四型胶原蛋白(IV-C)检测试剂,其特征在于包括试剂R1和试剂R2,所述试剂R1和试剂R2的组成如下:
1)试剂R1的组分为:
缓冲液 80mmol/L,
RHEODOL TW-O320V 1g/L,
AMINON C-11S 0.5g/L,
防腐剂 0.1g/L;
2)试剂R2的组分为:
缓冲液 50mmol/L,
羊抗人四型胶原蛋白抗体包被胶乳颗粒 0.12%~0.2%(W/V),
聚乙烯基吡硌烷酮 0.1g/L,
γ-环糊精 0.2g/L,
黄原胶 0.1g/L,
氯化钠 2g/L,
丙三醇 3ml/L,
海藻糖 15~25g/L,
PEG-6000 5~10g/L,
防腐剂 0.1g/L;
所述羊抗人四型胶原蛋白抗体包被胶乳颗粒的制备方法如下:
取表面羧基化的粒径为130-200nm的聚苯乙烯胶乳颗粒,加入pH=6.0的双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷缓冲液,终浓度0.8%;然后加入羊抗人四型胶原蛋白抗体及适量EDC,室温下温和搅拌反应3小时,11000rpm离心30分钟,去除上清,所得沉淀即为羊抗 人四型胶原蛋白抗体包被胶乳颗粒。
2.根据权利要求1所述的四型胶原蛋白检测试剂,其特征在于试剂R1中缓冲液为25℃,pH为7.2的TAPSO缓冲液。
3.根据权利要求1所述的四型胶原蛋白检测试剂,其特征在于试剂R2中缓冲液为25℃,pH为7.5的TAPSO缓冲液。
4.根据权利要求1所述的四型胶原蛋白检测试剂,其特征在于所述防腐剂为甲基异噻唑啉酮。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的四型胶原蛋白检测试剂,其特征在于使用全自动生化分析仪利用终点法进行测定四型胶原蛋白,检测主波长为570nm。
6.根据权利要求5所述的四型胶原蛋白检测试剂,其特征在于所述试剂R1和试剂R2的比例为4:1。
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