[发明专利]具有黏附能力的表皮细胞生长因子及其编码基因、制备方法和应用在审
申请号: | 201810167384.4 | 申请日: | 2018-02-28 |
公开(公告)号: | CN108384788A | 公开(公告)日: | 2018-08-10 |
发明(设计)人: | 章培标;武振旭;陈利;王宇;王宗良 | 申请(专利权)人: | 中国科学院长春应用化学研究所 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C07K14/485;C12N15/70;C12P21/02;A61L27/60;A61L27/54;A61L27/22 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 潘颖;赵青朵 |
地址: | 130022 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黏附 表皮细胞生长因子 创伤修复材料 基因片段 编码基因 制备方法和应用 生物活性 持续性 甘氨酸 柔性链 短肽 制备 增殖 分化 细胞 | ||
1.一种DNA分子,其特征在于,所述DNA分子依次由编码YKYKY短肽的基因片段、编码甘氨酸柔性链的基因片段和编码表皮细胞生长因子的基因片段连接而成。
2.根据权利要求1所述的DNA分子,其特征在于,所述编码甘氨酸柔性链的基因片段为编码4~10个甘氨酸的基因片段。
3.根据权利要求1所述的DNA分子,其特征在于,所述DNA分子的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。
4.一种蛋白质,其特征在于,其氨基酸序列的结构基因的碱基序列为权利要求1至3中任一项所述DNA分子。
5.如权利要求4所述蛋白质的制备方法,其特征在于,包括:将权利要求1至3中任一项所述DNA分子插入质粒,再将重组质粒转入原核表达载体中,表达蛋白。
6.一种蛋白质,其特征在于,权利要求4所述蛋白质的YKYKY短肽中的1个或几个L-酪氨酸替换为L-DOPA。
7.如权利要求6所述蛋白质的制备方法,其特征在于,包括:权利要求4所述蛋白质在酪氨酸酶催化作用下得到。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,具体为:将维生素C、PBS和权利要求4所述蛋白质混合,加入酪氨酸酶,24~26℃条件下静置1.5~2.5h。
9.一种黏附有表皮细胞生长因子的创伤修复材料,其特征在于,所述创伤修复材料为黏附有如权利要求6所述蛋白质的载体材料。
10.如权利要求9所述创伤修复材料的制备方法,其特征在于,将含有权利要求6所述蛋白质的溶液的pH值调至8.0~9.0,得到碱性蛋白溶液;将载体材料浸入碱性蛋白溶液中,在24~26℃条件下放置6~10h;
或者将含有权利要求4所述蛋白质的溶液、酪氨酸酶和载体材料混合,24~26℃条件下静置1.5~2.5h,pH值调至8.0~9.0,在24~26℃条件下放置6~10h。
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