[发明专利]基于多肽的重组高密度脂蛋白前体及其制备方法与应用

权利要求书

1.重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：由包含ApoA-I功能多肽和磷脂的原料在微流控芯片中自组装制备而成。

2.根据权利要求1所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述重组高密度脂蛋白前体为盘状重组高密度脂蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述重组高密度脂蛋白前体为粒径20纳米-40纳米的纳米颗粒。

4.根据权利要求1所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述微流控芯片为聚二甲基硅氧烷微流控芯片。

5.根据权利要求1或4所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：

所述ApoA-I功能多肽是通过双通道流体注射泵传输至所述微流控芯片；所述磷脂是通过单通道流体注射泵传输至所述微流控芯片；所述单通道流体注射泵设置在所述双通道流体注射泵之间；

所述双通道流体注射泵与所述微流控芯片之间由聚四氟乙烯软导管连接；所述单通道流体注射泵与所述微流控芯片之间由聚四氟乙烯软导管连接；

所述ApoA-I功能多肽与所述磷脂在所述微流控芯片上汇集，形成可调控的双微涡旋和雷诺系数在75-150的聚焦模式；

所述自组装为所述磷脂从有机相转变为水相，引发脂质体的形成；所述双微涡旋促使所述ApoA-I功能多肽迅速掺入新生的脂质体中，瞬时形成高密度脂蛋白前体的纳米颗粒。

6.根据权利要求5所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽和所述磷脂分别以流速为2.5ml/min～10ml/min和0.5ml/min～2ml/min的速度灌流混合。

7.根据权利要求1或6所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽和所述磷脂的质量比为0.1～1.6：1。

8.根据权利要求1所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽选自如下(1)～(11)的单体序列或所述单体序列以脯氨酸或丙氨酸连接形成的聚体形式或在所述功能多肽N端或C端连接荧光标签后形成的修饰多肽：

(1)序列表中序列12所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(2)序列表中序列13所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(3)序列表中序列14所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(4)序列表中序列15所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(5)序列表中序列16所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(6)序列表中序列17所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(7)序列表中序列18所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(8)序列表中序列19所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(9)序列表中序列20所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(10)序列表中序列21所示的氨基酸序列组成的单体序列；和/或

(11)序列表中序列22所示的氨基酸序列组成的单体序列。

9.根据权利要求1或8所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述ApoA-I功能多肽为如下(a)或(b)或(c)的多肽：

(a)序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的多肽；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有ApoA-I蛋白功能的由(a)衍生的多肽；

(c)在所述(a)或(b)的多肽N端或C端连接荧光标签后形成的修饰多肽。

10.根据权利要求1所述的重组高密度脂蛋白前体，其特征在于：所述磷脂为天然磷脂或合成磷脂；所述天然磷脂选自大豆、蛋黄、脑或脊髓中天然磷脂成分；所述合成磷脂选自二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰基磷脂酰胆碱、二油酰基卵磷脂或1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂。