[发明专利]一种液体复合微生物肥料及其制备方法

权利要求书

1.一种液体复合微生物肥料，其特征在于，添加有由功能微生物组成的混合菌液，所述功能微生物为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15，其体积比例为1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)。

2.根据权利要求1所述的液体复合微生物肥料，其特征在于，所述液体复合微生物肥料中还添加有大量元素水溶肥。

3.权利要求1或2所述的液体复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，包括步骤：

(1)将枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15分别接种于固体培养基上培养，得到活化后的菌种；

(2)活化后的菌种分别接种于液体培养基中，培养至各液体培养基的OD600值在3.0～4.0时停止培养，获得一级种子；

(3)一级种子分别接种于液体培养基中，培养至各液体培养基的OD600值在3.0-4.0时停止培养，制得含二级种子的种子液；

(4)枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、毕赤酵母、低温菌B5-16和低温菌B6-15的种子液按体积比例1：(1～5)：(2～6)：(1～5)：(1～4)混合，得混合种子液；

(5)混合种子液按体积比5-20％的接种量接种于发酵液中，进行高密度混合发酵培养，至混合液中活菌数为10亿/mL～100亿/mL时停止培养，得半成品；

(6)大量元素水溶肥加热溶解，与所述半成品混合。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，培养枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、低温菌B5-16和低温菌B6-15的固体培养基均为土豆、蔗糖、琼脂、水按质量体积比100～300g：20g：15～20g:1000mL制成；培养温度为15～42℃，时间为1～3天；

培养毕赤酵母的固体培养基为牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水按质量体积比3g：10g：5g：15～20g 1000mL制成；培养温度为15～38℃，时间为2～6天。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，毕赤酵母在温度15～38℃，摇床转速100～200r/min的条件下培养2～6天，枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、低温菌B5-16、B6-15在温度15～42℃，摇床转速100～200r/min的条件下培养1～3天。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，按一级种子培养液的体积比为5～20％接种，毕赤酵母在温度15～38℃，搅拌速度100～200r/min，通气量0.5～1.5vvm的条件下培养至其OD600值为3.0～4.0，枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、低温菌B5-16、B6-15在温度15～42℃，搅拌速度为100～200r/min，通气量为0.5～1.5vvm的条件下培养至其OD600值为3.0～4.0。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述发酵液为酵母发酵产物8～10质量份和中草药植物提取液0～2质量份组成。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，在高密度混合发酵培养过程中用糖蜜进行碳源补料，每2h时间补1～2％，用牛肉膏和蛋白胨进行氮源补料，每2h时间补1～2％。

9.根据权利要求3～8任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，所述大量元素水溶肥加热至35～50℃，按质量比1：(1～1.5)溶解在水中，与所述半成品按体积比1：(0.6～1.5)混合。

10.权利要求1或2所述的液体复合微生物肥料在植物培养中的应用，其特征在于，在应用时稀释200～500倍，用于滴灌、冲施或叶面喷施。