[发明专利]具有细胞毒活性的吲哚咔唑类生物碱及制备方法、用途

权利要求书

1.具有细胞毒活性的吲哚咔唑类生物碱，其特征在于：所述结构如式II所示：

2.如权利要求1所述的具有细胞毒活性的吲哚咔唑类生物碱在制备抗肿瘤药物中的应用。

3.如权利要求1所述的具有细胞毒活性的吲哚咔唑类生物碱在在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述的肿瘤为肝癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌或白血病。

4.如权利要求1所述的具有细胞毒活性的吲哚咔唑类生物碱在制备细胞增殖抑制剂中的用途。

5.一种药物组合物，其特征在于：包括如权利要求1所述的具有细胞毒活性的吲哚咔唑类生物碱和药学上可接受的载体。

6.吲哚咔唑类生物碱的制备方法，其特征在于：所述吲哚咔唑类生物碱的结构如式I和式II所示：

所述制备方法包括以下步骤：

1)将重组菌株接种于液体培养基I中，摇床培养，获得种子液；所述的重组菌株通过下述方法构建得到：(a)以含有spc基因簇的黏粒pWLI625为基础，采用同源重组的方法用硫酸安普拉霉素抗性基因aac(3)IV替代spcMA基因，aac(3)IV基因后被XbaI酶切去除；(b)再用aac(3)IV基因替代spcMB基因，aac(3)IV基因后被speI酶切去除；(c)获得的黏粒加载上异源表达元件aac(3)IV-oriT-导入天蓝色链霉菌Streptomyces coelicolorM1146中异源表达，获得重组菌株M1146/pWLI628；

2)将步骤1)得到的种子液接种于液体培养基II中，摇床培养，萃取得发酵产物；

3)将步骤2)得到的发酵产物进行分离纯化，得到化合物。

7.根据权利要求6所述的吲哚咔唑类生物碱的制备方法，其特征在于：步骤2)所述的萃取，具体为：将发酵液离心，菌体用丙酮超声破碎后，蒸干丙酮，与上清混合，用两倍体积乙酸乙酯萃取发酵产物；步骤3)所述的分离纯化包括：发酵产物经制备柱色谱和半制备柱色谱获得化合物。