[发明专利]一种海洋低温葡萄糖氧化酶及其在海产品保鲜中的应用

说明书

本发明属于发酵工程领域，具体是一种海洋低温葡萄糖氧化酶及其在海产品保鲜中的应用。该酶产自海洋Penicillium crustosum（GenBank登录号MG983981）。其应用在海产品保鲜中，保鲜方法为将需要保鲜的海产品先在海洋低温葡萄糖氧化酶溶液和葡萄糖溶液的混合液中浸渍2~20 min，浸渍后再置于保鲜盒中低温保鲜；其中海洋低温葡萄糖氧化酶溶液的浓度为10~60 mg/L，葡萄糖溶液的浓度为1~15 mg/L，海洋低温葡萄糖氧化酶溶液与葡萄糖溶液混合的体积比为1:1~3。本发明低温葡萄糖氧化酶在低温条件下，除氧更高效，能够有效防止蛋白质、脂肪等营养成分的氧化，替代了存在安全隐患的化学保鲜。

技术领域

本发明属于发酵工程领域，具体是一种海洋低温葡萄糖氧化酶及其在海产品保鲜中的应用。

背景技术

近年来海产品以富含蛋白和不饱和脂肪酸等独特营养成分而受追捧。我国海域辽阔，拥有丰富海洋资源，海产品的生产将创造巨大经济财富。但海产品因蛋白和水分含量高，存在大量细菌，捕捞出水后极易腐烂变质，影响加工、运输、销售和保存。因此海产品捕捞后应及时采取保鲜措施，以减少营养的消耗和产品的腐烂变质。

目前，海产品保鲜常用方法包括低温保鲜、化学保鲜等。单纯的低温保鲜会造成海产品口感的变化。化学保鲜利用化学制剂作为保鲜剂，但往往会造成化学药物残留。随着化学保鲜引起的安全问题日益严重，生物保鲜因其天然、安全的特点而逐渐被广泛利用。

葡萄糖氧化酶作为一种新型食品添加剂，具有绿色、安全、无污染等特点。用于海产品保鲜，一方面可以氧化葡萄糖产生葡萄糖酸，降低海产品表面pH值，达到抑菌的目的；另一方面，氧气的除去，可以抑制微生物的生长，并且防止脂肪等营养成分氧化。葡萄糖氧化酶的添加，可保持海产品的色、香、味，提供更高的营养价值。但是在低温条件下，葡萄糖氧化酶活性低，保鲜效果不佳。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种海洋低温葡萄糖氧化酶，本发明还提供了海洋低温葡萄糖氧化酶的制备方法及其在海产品保鲜中的应用。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种海洋低温葡萄糖氧化酶，所述海洋低温葡萄糖氧化酶产自海洋Penicillium crustosum，（GenBank登录号MG983981）。

上述海洋低温葡萄糖氧化酶的制备方法，所述方法具体如下：

制备过程为Penicillium crustosum接种于发酵培养基，经发酵培养，获得发酵液，过滤菌体后8000r/min 离心20min，硫酸铵盐析过夜，离心，沉淀使用缓冲液复溶后超滤，过葡聚糖层析柱，获得纯酶液。

上述制备方法中，发酵培养基为1-10% 葡萄糖、0.1-3.0% 胰蛋白胨、0.1-2.0%NaNO₃、0.1-0.3% FeSO₄、0.1-0.5% MgSO₄、0.1-1.0% KH₂PO₄，发酵条件为15-25℃、140-200r/min；硫酸铵浓度为75%，离心条件为12000 r/min离心10 min；超滤条件为截留量为100 kDa的超滤管，5000 r/min超滤10 min；缓冲液为1 mol/L pH7.0的磷酸钠缓冲液，柱层析填料为Sephadex G-100。

上述海洋低温葡萄糖氧化酶应用在海产品保鲜中。

具体地，所述海产品为对虾，带鱼。

上述海洋低温葡萄糖氧化酶用于海产品保鲜的保鲜方法为：