[发明专利]一种提取与快速筛选黄芪中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法

权利要求书

1.一种提取与快速筛选黄芩中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：

(1)称取100g黄芩，粉碎，过100目筛，使用有机溶剂热回流提取3次，提取时间2-3h，70-80℃，使用正丁醇溶液对70％乙醇提取物进行萃取，取有机相溶液减压浓缩后旋干，最后加甲醇复溶得到10μg/mL样品液，过0.22μm滤膜，即得到黄芩活性成分溶液，装瓶，4℃保存，备用。

(2)在反应器中加入190μL乙酸铵缓冲液和2μL上述步骤制得的黄芩活性成分溶液，再加入8μLα-葡萄糖苷酶，得混合液体积200μL，置于恒温反应器中孵育，之后将混合液加入超滤离心管(2mL,10,000MWCO)中超滤离心，收集滤渣，弃掉滤液；再用乙酸铵缓冲液洗涤，重复三次，然后加入200μL体积比为1:1的甲醇-水混合溶液后超速离心，重复三次，收集滤液，将滤液过膜，通过液相色谱-质谱联用技术检测，得到天然α-葡萄糖苷酶抑制剂。

2.根据权利要求1所述的提取与快速筛选黄芩中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于，所述热回流有机溶剂依次为正己烷、氯仿和浓度70％的乙醇溶液。

3.根据权利要求1所述的提取与快速筛选黄芩中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于，所述正丁醇溶液为水饱和后的溶液。

4.根据权利要求1所述的提取与快速筛选黄芩中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于所述洗脱剂依次为浓度10％、30％、50％、70％、90％的乙醇水溶液。

5.根据权利要求1所述的提取与快速筛选黄芩中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于，所述孵育条件为在37℃下孵育25-35min。

6.如权利要求1所述的提取与快速筛选黄芪中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于，所述超速离心为在离心力10000g下离心8-12min。

7.根据权利要求1所述的提取与快速筛选黄芪中天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于，还包括α-葡萄糖苷酶抑制活性的检测。