[发明专利]一种胶原蛋白多肽粉的制备方法及其在免疫学中的应用在审
| 申请号: | 201810146920.2 | 申请日: | 2018-02-12 |
| 公开(公告)号: | CN108490185A | 公开(公告)日: | 2018-09-04 |
| 发明(设计)人: | 叶一;李欢;倪晓涛;王佩瑞;陆亮;操凤文;肖琨;李秋萍;杨茜茹;朱轩仪 | 申请(专利权)人: | 上海艾瑞德生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N21/64;C07K14/78;C12P21/06;C07K1/14 |
| 代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 马莉华;崔佳佳 |
| 地址: | 201114 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 胶原蛋白多肽 制备 上清液 蛋白酶水解 免疫检测 透析纯化 准确度 后提取 浆状物 酶解液 免疫学 除杂 盐析 测试 应用 | ||
1.一种胶原蛋白多肽粉的制备方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:
(a)提供一含有胶原蛋白多肽的组织作为原料;
(b)将所述含胶原蛋白多肽的组织进行切碎处理,从而形成小块状组织,其中所述小块状组织的大小为1-5mm3;
(c)对所述小块状组织进行浆化处理,形成浆状物;
(d)对所述浆状物进行去杂处理,从而获得经去杂的浆状物;
(e)对所述经去杂的浆状物进行酶解处理,从而获得酶解液;
(f)任选地对所述酶解液进行灭活处理,从而获得经灭活的酶解液;
(g)对所述经灭活的酶解液进行盐析处理,从而获得含胶原蛋白多肽的上清液;
(h)对所述上清液进行透析处理,从而获得经透析的上清液,其中所述透析处理采用截留分子量为3-7kDa的透析膜;
(j)对经透析的上清液进行干燥,从而获得所述的胶原蛋白多肽粉。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(c)中,所述的浆化处理包括:将所述的小块状组织与盐溶液进行混合,形成第一混合物,并对所述第一混合物进行超声处理,从而形成所述的浆状物。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤(e)中,所述酶解处理包括:向所述经去杂的浆状物加入蛋白酶。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的酶解处理中,蛋白酶和经去杂的浆状物的质量比为:7-13:1。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的盐析处理包括:向所述经灭活的酶解液加入盐或盐溶液,从而获得第二混合物,并对第二混合物进行离心,从而获得含胶原蛋白多肽的上清液。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述盐溶液选自氯化钠溶液、氯化钾溶液、氯化镁溶液或其组合。
7.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(j)中,所述的干燥包括:真空干燥、加热干燥、干燥剂干燥及其组合。
8.一种使用权利要求1-7中任一项所述的制备方法制备的胶原蛋白多肽粉,其特征在于,所述的胶原蛋白多肽粉具有选自下组的一个或多个特性:
(i)分子量分为10-17KD;
(ii)含盐量为2%-5%;
(iii)粉末呈乳白色;以及
(iv)粉末溶于水呈淡黄色。
9.一种降低体外免疫检测的背景信号的方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:在所述免疫检测中使用权利要求8所述的胶原蛋白多肽粉,从而降低体外免疫检测的背景信号。
10.一种权利要求8所述的胶原蛋白多肽粉的用途,其特征在于,用于制备一制剂,所述制剂用于降低体外免疫检测的背景信号。
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