[发明专利]一种威灵仙中5-羟甲基糠醛含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种威灵仙中5‑羟甲基糠醛含量的检测方法，该检测方法通过水提取法对威灵仙进行提取，取续滤液通过高效液相色谱测定检测威灵仙中的5‑羟甲基糠醛的含量。本发明的含量检测方法可以应用于中药威灵仙炮制过程中检测5‑HMF及定量，该方法操作简单，重复性好，稳定性好，结果真实可靠。本发明的威灵仙中5‑羟甲基糠醛含量的检测方法不仅针对威灵仙药材，而且是不同基源的威灵仙，同其它的5‑HMF方法相比，具有良好的专属性。

技术领域

本发明属于药物化学成分的检测，具体涉及一种威灵仙中5-羟甲基糠醛含量的检测方法。

背景技术

5-羟甲基糠醛(5-HMF)主要是由己糖经高温或酸性条件下分解产生，广泛存在于含有糖类物质的中药和食品中。中药一般经过炮制或加热后5-HMF含量增加。5-HMF具有一定的毒理作用，能与人体蛋白质结合使人体中毒。但是，近年来也有文献报道，5-HMF也具有改善血液流变学等对人体有利的作用。因此5-羟甲基糠醛的药理作用存在争议。在这种情况下，中药应尽量减少5-羟甲基糠醛的产生。

近年来，中药板蓝根、当归、猫爪草、云木香等药材中都发现了5-HMF，何首乌、山茱萸等中药材经过炮制加热后也可以产生5-HMF。威灵仙入药始于《新修本草》，性辛，咸，温，具有解毒抗癌、镇痛抗炎、抗菌与抑菌、解痉、利胆、美白等作用，随着现代科学技术及诊疗技术的发展，威灵仙中的化学成分逐步清晰，主要含有皂苷类化合物、木质素类、挥发油、微量元素等。威灵仙是常用的中药，在炮制过程中会产生5-HMF，史杜坡等在东北线莲化学成分研究，中草药第38卷第3期2007年3月，报道威灵仙中检测到5-HMF，但是该研究仅仅是检测存在到5-HMF，没有具体的含量过程，并且该检测是经过醇提，用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，反复硅胶柱分离，方法繁琐并且效果一般；此外，东北铁线莲只是威灵仙中的一种。按2015年版中国药典规定，威灵仙的基源包括三种，分别为毛茛科植物威灵仙Clematischinensis Osbeck、棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematismanshurica Rupr.等。文献报道的由于中药成分复杂，同科不同属，甚至是同属不同种的中药在化学成分组成方面都往往存在很大的差异，因此，同一成分在不同中药中的含量测定方法在专属性方面都有着不同的要求。对于威灵仙来说，其药材基源的复杂性就为5-HMF成分的含量测定带来这样的一个问题。

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明提供一种威灵仙中5-羟甲基糠醛含量的检测方法，该方法可以应用于中药威灵仙炮制过程中检测5-HMF及定量，该方法操作简单，重复性好，稳定性好，结果真实可靠。

技术方案：为了实现上述目的，如本发明所述一种威灵仙中5-羟甲基糠醛的含量检测方法，其特征在于，通过水提取法对威灵仙进行提取，取续滤液通过高效液相色谱测定检测威灵仙药材中的5-羟甲基糠醛的含量。

所述含量检测方法具体包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取威灵仙，加入水提取，提取液离心过滤，定容摇匀，微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取5-HMF对照品，加甲醇或水溶液溶解，定容，摇匀即得；

(3)高效液相色谱法测定：分别吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定，外标法定量，计算，即得。

其中，步骤(1)所述取威灵仙药材，经粉粹机粉粹，过筛，精密称定，置圆底烧瓶中，加入水溶液，加热回流提取或超声提取，合并提取液并离心，过滤，定容至容量瓶中，加水至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。