[发明专利]飞蝗过氧化物还原酶PRX5及其编码基因与应用

说明书

本发明公开了飞蝗过氧化物还原酶PRX5及其编码基因与应用。本发明首先从飞蝗中克隆了飞蝗过氧化物还原酶基因PRX5，并对飞蝗过氧化物还原酶基因PRX5设计引物，合成了用于飞蝗过氧化物还原酶基因PRX5的dsRNA，且运用注射法将dsRNA导入飞蝗对飞蝗过氧化物还原酶基因PRX5进行RNAi。本发明还通过真核表达的方法成功制备得到飞蝗过氧化物还原酶PRX5，并运用注射法将飞蝗过氧化物还原酶PRX5导入飞蝗验证其功能。结果表明：飞蝗过氧化物还原酶PRX5可调控飞蝗滞育。本发明为更深入理解飞蝗滞育机制、创制新的生物农药制剂提供理论基础。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及飞蝗过氧化物还原酶PRX5及其编码基因与应用。

背景技术

过氧化物还原酶家族(Peroxiredoxins)代表一类硫醇依赖的过氧化物酶家族，功能是减少组织中过氧化氢、烷基氢过氧化物和过氧硝酸盐的含量。PRX5也叫做PrxⅤ，是唯一一个哺乳动物非典型2-Cys过氧化物还原酶。

人体PRX5是一种过氧化物酶，被发现于线粒体和过氧化物酶体中，推测可能与活性氧/活性氮(ROS/RNS)的产生相关。此外，在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)线粒体或细胞质基质中表达的人体PRX5保护酵母细胞免受氧化应激胁迫；在CHO和HT-22细胞的细胞质基质、线粒体和细胞核，以及肌腱细胞的细胞质基质中过表达人体PRX5后，由于暴漏在外源过氧化氢中导致的细胞死亡大大减少；在小鼠大脑中，外源的人体PRX5重组体可以保护大脑细胞免于受到兴奋毒性诱导的兴奋性毒素压力；PRX5还可以保护细胞抵抗线粒体或细胞核DNA损伤；此外，抑制细胞中PRX5的表达后，细胞更容易受到过氧化氢引起的氧化损伤和细胞凋亡；在爪蟾属的胚胎中，人体PRX5基因异源表达可以保护细胞不受酒精诱导产生的ROS/RNS的伤害；在果蝇(Drosophila melanogaster)的直系同源基因PRX5不仅可以抵御氧化反应伤害和细胞凋亡，还可以增加果蝇的寿命。

发明内容

本发明要解决的技术问题是如何防治害虫。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了一种过氧化物还原酶。

本发明提供的过氧化物还原酶来源于飞蝗，其名称为PRX5，是如下a)或b)或c)或d)的蛋白质：

a)氨基酸序列是序列2所示的蛋白质；

b)在序列2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；

c)将序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；

d)与序列2所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。

其中，序列2由185个氨基酸残基组成。

为了使a)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中序列2所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1、标签的序列