[发明专利]高油酸转基因大豆事件E2D9050外源插入片段侧翼序列及其应用有效
| 申请号： | 201810138897.2 | 申请日： | 2018-02-03 |
| 公开（公告）号： | CN108179147B | 公开（公告）日： | 2022-02-11 |
| 发明（设计）人： | 仲晓芳;杨向东;杨静;邢国杰;牛陆;贺红利;郭东全;钱雪燕;姚瑶 | 申请（专利权）人： | 吉林省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 130033 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 油酸 转基因 大豆 事件 e2d9050 插入 片段 侧翼 序列 及其 应用 | ||
1.高油酸转基因大豆事件E2D9050外源插入片段左边界和右边界侧翼序列，其特征在于，外源插入片段左边界侧翼序列如SEQ ID NO.2所示，外源插入片段右边界侧翼序列如SEQ ID NO.3所示，由来源于大豆基因组序列和来源于外源插入片段序列组成的DNA序列；其中：
外源插入片段左边界侧翼序列特征包括：
(1)SEQ ID NO.2第1-521位点序列来源于栽培大豆沈农9号基因组序列；
(2)SEQ ID NO.2第522-966位点序列来源于外源插入片段序列；
外源插入片段右边界侧翼序列特征包括：
(1)SEQ ID NO.3第1-376位点序列来源于外源插入片段序列；
(2)SEQ ID NO.3第377-988位点序列来源于栽培大豆沈农9号基因组序列。
2.权利要求1所述侧翼序列在转基因大豆事件E2D9050特异性检测中的应用，其特征在于，依据权利要求1所述侧翼序列，制备特异性检测所述侧翼序列的引物或探针。
3.权利要求2所述的应用，其特征在于，使用两条引物组合，其中一条引物为依据SEQID NO.2第1-521位点序列设计的正向引物，另一条引物为依据SEQ ID NO.2第522-966位点序列设计的反向引物，即所述两条引物组合为权利要求1所述外源插入片段左边界侧翼序列的特异性检测引物。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述外源插入片段左边界侧翼序列的特异性检测引物如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示：
所述正向引物SEQ ID NO.4为：5’-ACGAATGAATAGGAGCGAAGAAGG-3’
所述反向引物SEQ ID NO.5为：5’-TGGGAAAACCCTGGCGTTACCC-3’。
5.权利要求2所述的应用，其特征在于，使用两条引物组合，其中一条引物为依据SEQID NO.3第1-376位点序列设计的正向引物，另一条引物为依据SEQ ID NO.3第377-988位点序列设计的反向引物，即所述两条引物组合为权利要求1所述外源插入片段右边界侧翼序列的特异性检测引物。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述外源插入片段右边界侧翼序列特异性检测引物如SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7所示：
所述正向引物SEQ ID NO.6为：5’-AGAGGCGGTTTGCGTATTGGA-3’
所述反向引物SEQ ID NO.7为：5’-GTTGACAATAGAAATAGACCAAAATAACC-3’。
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