[发明专利]用于革兰氏阳性菌培养基的蚕蛹提取物的制备方法

说明书

本发明公开了用于革兰氏阳性菌培养基的蚕蛹提取物的制备方法，其具体步骤为：向蚕蛹粉中加入脱脂剂脱脂，抽滤，滤渣即为脱脂蚕蛹，烘干；向脱脂蚕蛹中加入磷酸缓冲液和中性蛋白酶，酶解，灭酶，冷却后离心，上清液喷雾干燥，即得蚕蛹提取物。有益效果为：本发明制备方法简单可行，脱脂效率高，提取物中蛋白得率高、纯度高、活性高、分子量较为集中、易于被革兰氏阳性菌吸收利用，易于工业化生产，安全性更高，提高蚕蛹附加值。

技术领域

本发明涉及蚕蛹深加工技术领域，尤其是涉及用于革兰氏阳性菌培养基的蚕蛹提取物的制备方法。

背景技术

食源性疾病是发展中国家和发达国家的首要食品安全问题，对人类健康危害严重，尤其是对儿童、孕妇和老人。食品在生产和贮藏过程中，易受细菌性微生物感染而腐败变质，并导致食物中毒和食源性疾病影响人类健康。采用防腐剂抑制腐败菌与食源性致病菌是贮藏食品的有效手段之一。常见的食源性致病菌种类繁多，其中包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。金黄色葡萄球菌广泛存在于自然界中，是常见的革兰阳性球菌。在美国和加拿大由它产生的耐热肠毒素引起的食物中毒分别约占细菌性食物中毒事件33%和45%。由它引起的细菌性食物中毒仅次于沙门氏菌和副溶血弧菌引起的食物中毒。随着生物学和微电子学发展，免疫学和分子生物学等方面都为金黄色葡萄球菌快速检测提供了更加高效的手段。但因需要其昂贵的仪器设备和专业的技术人才，遏制了国内对金黄色葡萄球菌检测的实际需求。显色培养基技术是近年来发展的具有操作简捷、经济实用等特点的生化快速检测方法，但培养基中添加的抑菌物质等经常会影响目标菌的生长及产生的特异性物质。因此，需要研究一种新型的培养基成分，为金黄色葡萄球菌快速检测培养基的研制奠定基础。

自古以来，桑蚕业就在中国的农业中占有着重要地位，我国是世界上最早且最大的养蚕缫丝的国家。2014年，我国蚕茧年产量据报道有65万吨左右，约占世界总产量的80%。蚕蛹是将蚕茧缫丝后的副产物，一般每生产1吨生丝会产出0.8吨的干蛹，因而蚕蛹产量十分巨大。现代科学研究发现，蚕蛹富含蛋白质、脂肪、甲壳素、糖类以及多种蛋白激素、维生素、微量元素等生物活性成分，具有很高的营养、药用价值和广阔的市场前景。蚕蛹中的蛋白质在所有成分中的含量最高，含水量在4-6%的干蚕蛹中，蛋白质含量为50-65%左右，油脂约占23-30%，甲壳素含量约为2-3%，并富含糖类、多种维生素、丰富的微量元素及抗菌肽等生物活性成分等。因而蚕蛹在食品、饲料、化工等领域有着广泛的应用。而由于缺少深加工技术，大部分蚕蛹被用于饲料及肥料，附加值一直较低。蚕蛹提出得到的提取物中含有蚕蛹蛋白，可制备皮革揩光剂、粘胶剂、微生物培养基等，使蚕蛹资源得到了进一步的开发与利用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备方法简单可行，脱脂效率高，提取物中蛋白得率高、纯度高、活性高、分子量较为集中、易于被革兰氏阳性菌吸收利用，易于工业化生产的用于革兰氏阳性菌培养基的蚕蛹提取物的制备方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

用于革兰氏阳性菌培养基的蚕蛹提取物的制备方法，包括脱脂和酶解，其具体步骤为：

脱脂：按料液比为1:4-6（g/mL）向蚕蛹粉中加入脱脂剂，然后在35-45℃下脱脂20-30min，冷却后抽滤，滤渣即为脱脂蚕蛹，然后在50-70℃下烘干，备用，该脱脂步骤具有脱脂率高、溶剂无残留、无毒不易燃、蛋白质不变形等优点，同时脱脂剂容易回收，能够降低脱脂成本；