[发明专利]一种构建肾脏持续性固有巨噬细胞浸润小鼠模型的方法

权利要求书

1.一种构建肾脏持续性固有巨噬细胞浸润小鼠模型的方法，其特征在于，包括特异性地在小鼠肾小管细胞内表达IL34基因的步骤，所述特异性地在小鼠肾小管细胞内表达IL34基因的步骤通过使全能细胞中同时具有IL34条件表达框和肾小管组织特异性启动子驱动的Cre重组酶表达框来实现；

所述方法包括以下步骤：

S1：构建带有所述IL34条件表达框的LSL-IL34小鼠；

S2：将所述LSL-IL34小鼠与带有所述肾小管组织特异性启动子驱动的Cre重组酶表达框的小鼠杂交，得到的子代小鼠即为肾脏持续性固有巨噬细胞浸润小鼠模型；

所述IL34条件表达框从5’到3’依次包括靶基因表达启动子、两端带有方向相同的loxp序列的转录阻碍片段和IL34基因编码框；

所述肾小管组织特异性启动子为Cdh16基因启动子；所述靶基因表达启动子为CAG启动子；所述IL34条件表达框插入于Rosa26基因位点处；

所述带有肾小管组织特异性启动子驱动的Cre重组酶表达框的小鼠为Cdh16-cre小鼠；

步骤S1包括以下步骤：

S11：构建打靶载体，所述打靶载体除了包括所述IL34条件表达框外，还在两端设置有与Rosa26基因同源的片段；

S12：将步骤S11中构建的所述打靶载体转入小鼠受精卵中，通过CRISPR/Cas9系统将所述IL34条件表达框插入到Rosa26基因位点处，得到LSL-IL34小鼠受精卵；

S13：将所述LSL-IL34小鼠受精卵培养成LSL-IL34小鼠。