[发明专利]青蒿中有效成分的检测方法

说明书

本发明属于将超高效液相色谱和质谱结合起来测试或分析材料技术领域，具体涉及一种青蒿中有效成分的检测方法。所述检测方法包括以下步骤：将样品破碎、过筛，然后进行超声萃取，接着用超高效液相色谱进行梯度洗脱，再用质谱法检出，用峰面积外标法定量检测。该方法能够同时检测青蒿药材中青蒿素、青蒿酸、青蒿乙素、双氢青蒿素、山奈酚、木犀草素和槲皮素的含量，其检测时间短，灵敏度高，专属性强，准确度高，线性关系良好，精密度高，稳定性强，重复性好。

技术领域

本发明属于将超高效液相色谱和质谱结合起来测试或分析材料技术领域，具 体涉及一种青蒿中有效成分的检测方法。

背景技术

青蒿为菊科一年生草本植物黄花蒿(Artemisia annua L.)的干燥地上部分，其性苦、辛寒，具有清透虚热、凉血除蒸、解暑、截疟等功效(中华人民共和国药 典(一部))，国家药典委员会编，北京：中国医药科技出版社，2015年第198 页，公开日2015年12月31日)。青蒿分布广泛，重庆、四川、贵州、广西、广 东、江西、湖北、湖南、江苏、河北、河南、山东和陕西等地区均有分布(“青 蒿适生地分析评价方法探讨”，刘峻明等，中国农业资源与区划，2006年第27 卷第4期，第14-17页，公开日2006年08月31日)。其中，重庆拥有优质的青 蒿种质资源(“不同产地的青蒿药用成分含量研究”，张雪等，中国药房，2009年 第20卷第15期，第1188-1191页，公开日2009年12月31日)，为全国最大的 青蒿种植基地。

除青蒿素外，青蒿药材中还含有青蒿酸、青蒿乙素和以山奈酚、木犀草素、 槲皮素为代表的黄酮类化合物，这些成分协同青蒿素对疟疾具有治疗作用(“青 蒿化学成份及其与青蒿素伍用对鼠疟的药效学研究”，纪晓光等，寄生虫与医学 昆虫学报，2008年第15卷第4期，第198-201页，公开日2008年12月31日)。 研究还表明，双氢青蒿素对人肺腺癌A549细胞在体内外均有生长抑制作用(“双 氢青蒿素抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究”，陈卫强等，中国肺病杂志， 2005年第8卷第2期，第85-88页，公开日2005年04月30日)。目前，青蒿药 材的质量研究主要以青蒿素、青蒿酸、青蒿乙素为含测指标，双氢青蒿素、山奈 酚、木犀草素、槲皮素等化合物的研究较少，分析方法包括柱前衍生-高效液相 色谱法(英文简称柱前衍生-HPLC)、高效液相色谱-紫外联用法(英文简称 HPLC-UV)、高效液相色谱-蒸发光散射检测器联用法(英文简称HPLC-ELSD) 和高效液相色谱-紫外-蒸发光散射检测器法(英文简称HPLC-UV-ELSD)(“柱前 衍生-RP-HPLC法测定青蒿中青蒿素的含量”，刘丽芳等，中国野生植物资源，2004年第23卷第6期，第60-62页，公开日2004年12月31日；“UV法与HPLC 法测定青蒿中青蒿素含量的方法比较”，丁小莉等，中国药房，2011年第22卷 第3期，第246-248页，公开日2011年12月31日；“HPLC-ELSD测定不同产 地青蒿中青蒿素的含量”，胡向荣等，现代食品与药品杂志，2006年第16卷第3 期，第34-36页，公开日2006年12月31日；“HPLC-UV-ELSD法同时测定青 蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量”，张东等，药学学报，2007年第42卷 第9期，第978-981页，公开日2007年12月31日)。其中，柱前衍生-HPLC和 HPLC-UV不能同时测定青蒿素、青蒿酸、青蒿乙素、双氢青蒿素、山奈酚、木 犀草素和槲皮素的含量；HPLC-ELSD和HPLC-UV-ELSD的检测时间长，需要 30-60min，灵敏度低，含量在十万分之一以下的成分检测不出。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种青蒿中有效成分的检测方法，该方 法能够同时检测青蒿药材中青蒿素、青蒿酸、青蒿乙素、双氢青蒿素、山奈酚、 木犀草素和槲皮素的含量，检测时间短，15min内即可检测出含量，灵敏度高， 能够检测出含量在十万分之一以下的成分。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：