[发明专利]PLEKHO1基因的用途及其相关药物在审
申请号: | 201810128244.6 | 申请日: | 2018-02-08 |
公开(公告)号: | CN108342389A | 公开(公告)日: | 2018-07-31 |
发明(设计)人: | 陈新页 | 申请(专利权)人: | 上海滴英生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;C12Q1/6886;A61K31/713;A61K31/7088;A61P35/00 |
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地址: | 200120 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因 慢病毒 核酸构建体 基因干扰 肿瘤治疗 靶细胞 小分子干扰RNA 抑制肿瘤细胞 肿瘤细胞凋亡 特异性抑制 药物制备 重要意义 高效率 构建 侵染 人源 生长 | ||
1.一种降低肿瘤细胞中PLEKHO1基因表达的分离的核酸分子,所述核酸分子包含双链RNA或shRNA,所述双链RNA中含有能够在严紧条件下与PLEKHO1基因杂交的核苷酸序列;所述shRNA中含有能够在严紧条件下与PLEKHO1基因杂交的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的一种降低肿瘤细胞中PLEKHO1基因表达的分离的核酸分子,其特征在于,所述双链RNA包含第一链和第二链,所述第一链和第二链互补共同形成RNA二聚体,并且所述第一链的序列与PLEKHO1基因中的靶序列基本相同;所述shRNA包括正义链片段和反义链片段,以及连接所述正义链片段和反义链片段的茎环结构,所述正义链片段和所述反义链片段的序列互补,并且所述正义链片段的序列与PLEKHO1基因中的靶序列基本相同。
3.如权利要求2所述的一种降低肿瘤细胞中PLEKHO1基因表达的分离的核酸分子,其特征在于,所述PLEKHO1基因的靶序列含有SEQ ID NO:1所示序列;所述双链RNA为小干扰RNA,所述小干扰RNA第一链的序列为SEQ ID NO:9所示序列;所述shRNA的序列为SEQ ID NO:14所示序列。
4.一种PLEKHO1基因干扰核酸构建体,含有编码权利要求1-3任一权利要求所述分离的核酸分子中的shRNA的基因片段,并能表达shRNA。
5.如权利要求4所述PLEKHO1基因干扰核酸构建体,其特征在于,所述PLEKHO1基因干扰核酸构建体为干扰慢病毒载体。
6.如权利要求5所述PLEKHO1基因干扰核酸构建体,其特征在于,所述干扰慢病毒载体由将编码所述shRNA的基因片段克隆入慢病毒载体后获得,所述慢病毒载体选自:
pLKO.1-puro、pLKO.1-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-tGFP、pLKO.1-CMV-Neo、pLKO.1-Neo、pLKO.1-Neo-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-TagCFP、pLKO.1-puro-CMV-TagYFP、pLKO.1-puro-CMV-TagRFP、pLKO.1-puro-CMV-TagFP635、pLKO.1-puro-UbC-TurboGFP、pLKO.1-puro-UbC-TagFP635、pLKO-puro-IPTG-1xLacO、pLKO-puro-IPTG-3xLacO、pLP1、pLP2、pLP/VSV-G、pENTR/U6、pLenti6/BLOCK-iT-DEST、pLenti6-GW/U6-laminshrna、pcDNA1.2/V5-GW/lacZ、pLenti6.2/N-Lumio/V5-DEST、pGCSIL-GFP或pLenti6.2/N-Lumio/V5-GW/lacZ中的任一。
7.一种PLEKHO1基因干扰慢病毒,由权利要求5-6任一权利要求所述干扰慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装而成。
8.一种用于预防或治疗肿瘤的药物组合物,其有效物质含有权利要求1-3任一权利要求所述的降低肿瘤细胞中PLEKHO1基因表达的分离的核酸分子,权利要求4-6任一权利要求所述PLEKHO1基因干扰核酸构建体和/或权利要求7所述的PLEKHO1基因干扰慢病毒,以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
9.如权利要求8所述的一种用于预防或治疗肿瘤的药物组合物,在制备治疗肺癌或胶质瘤的肿瘤治疗药物中的应用;PLEKHO1基因在制备或筛选肿瘤治疗药物中的用途。
10.一种用于降低肿瘤细胞中PLEKHO1基因表达的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:存在于容器中的,权利要求1-3任一权利要求所述的分离的核酸分子,权利要求4-6任一权利要求所述PLEKHO1基因干扰核酸构建体和/或权利要求7所述的PLEKHO1基因干扰慢病毒。
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