[发明专利]基于FESI-sweeping-MSS联用在线富集测定痕量有机阴离子的方法

权利要求书

1.一种基于FESI-sweeping-MSS联用在线富集测定痕量有机阴离子的方法，所述有机阴离子为丹参素、原儿茶酸、香草酸的阴离子，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)制备阳离子涂层的毛细管柱

取新的石英毛细管，依次用1mol/L的NaOH水溶液、0.1mol/L的NaOH水溶液冲洗进行活化，接着依次用纯水A、离子液体、纯水B冲洗，得到阳离子涂层的毛细管柱备用；

所述离子液体为10～50mM的1-十二烷基-3-甲基咪唑硫酸氢盐的水溶液；

(2)三步在线富集测定标准溶液及构建标准曲线、试样检测

取丹参素、原儿茶酸、香草酸的标准品，以体积分数0.5％甲醇水溶液为溶剂配制得到混合标准溶液，将所得混合标准溶液和试样溶液分别进行毛细管电泳检测，得到混合标准溶液毛细管电泳谱图和试样溶液毛细管电泳谱图，以所得混合标准溶液毛细管电泳谱图中各标准品阴离子的峰面积为纵坐标、混合标准溶液中标准品的浓度为横坐标分别绘制丹参素、原儿茶酸、香草酸的标准曲线，完成标准曲线的构建，将所得试样溶液毛细管电泳谱图中丹参素、原儿茶酸、香草酸阴离子的峰面积分别代入构建的标准曲线中，计算得出试样中丹参素、原儿茶酸、香草酸的含量；

所述混合标准溶液中，丹参素的浓度范围在0.01～2.0μg/mL，原儿茶酸的浓度范围在0.01～2.0μg/mL，香草酸的浓度范围在0.01～2.0μg/mL；

所述毛细管电泳的条件如下：背景溶液BGS为20mM硼砂水溶液，pH值9.18；胶束溶液为1-十二烷基-3-甲基咪唑硫酸氢盐和硼砂的混合水溶液，其中1-十二烷基-3-甲基咪唑硫酸氢盐的浓度为6～18mM，硼砂的浓度为10mM；样品基质为纯净水；取步骤(1)准备好的阳离子涂层的毛细管柱，50mbar压力进胶束溶液10～60s、50mbar压力进混合标准溶液10～30s、-10kV电压进混合标准溶液30～270s、50mbar压力进体积分数60％甲醇水溶液1～9s，检测波长205nm、分离电压-20kV、温度30℃。

2.如权利要求1所述的基于FESI-sweeping-MSS联用在线富集测定痕量有机阴离子的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离子液体为30mM的1-十二烷基-3-甲基咪唑硫酸氢盐的水溶液。

3.如权利要求1所述的基于FESI-sweeping-MSS联用在线富集测定痕量有机阴离子的方法，其特征在于，所述步骤(1)为：取新的石英毛细管，在25kV压力下，依次用1mol/L的NaOH水溶液冲洗20min、0.1mol/L的NaOH水溶液冲洗10min进行活化，接着依次用纯水A冲洗10min、离子液体冲洗30min、纯水B冲洗5min，得到阳离子涂层的毛细管柱备用。

4.如权利要求1所述的基于FESI-sweeping-MSS联用在线富集测定痕量有机阴离子的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述毛细管电泳的条件如下：BGS为20mM硼砂水溶液，pH值9.18；胶束溶液为1-十二烷基-3-甲基咪唑硫酸氢盐和硼砂的混合水溶液，其中1-十二烷基-3-甲基咪唑硫酸氢盐的浓度为12mM，硼砂的浓度为10mM；样品基质为纯净水；取步骤(1)准备好的阳离子涂层的毛细管柱，50mbar压力进胶束溶液50s、50mbar压力进混合标准溶液20s、-10kV电压进混合标准溶液225s、50mbar压力进60％甲醇水溶液5s，检测波长205nm、分离电压-20kV、温度30℃。

5.如权利要求1所述的基于FESI-sweeping-MSS联用在线富集测定痕量有机阴离子的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述试样为中药复方丹参片，所述试样在毛细管电泳检测前经过如下预处理：将中药复方丹参片研磨成粉末状，按料液比1：20与甲醇混合，超声提取30min，离心取上清液，于-4℃保存待用。

6.如权利要求1所述的基于FESI-sweeping-MSS联用在线富集测定痕量有机阴离子的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述试样为生物样品大鼠尿液，所述试样在毛细管电泳检测前经过如下预处理：将正常大鼠尿样于13000rpm离心30min，取上清液得大鼠原尿样品，将大鼠原尿样品与甲醇等体积混合，震荡摇匀后于13000rpm离心30min，取上清液即为待测样品。