[发明专利]一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒在审
| 申请号： | 201810116648.3 | 申请日： | 2018-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN108179192A | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 周雪妍;印晓星;王席;赵云;陈春霞;尹弟;赵峰 | 申请（专利权）人： | 徐州医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 常州市科谊专利代理事务所 32225 | 代理人： | 孙彬 |
| 地址： | 221000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 子宫内膜癌 检测 基因多态性 特异性引物 变异位点 早期诊断 试剂盒 位点 单核苷酸多态性位点基因型 单核苷酸多态性位点 对子宫内膜癌 雌激素代谢 特异性扩增 相关基因 基因 内切酶 易感性 引物 指针 预测 应用 分析 | ||
1.一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，包括使用两个单核苷酸多态性位点基因型的特异性引物、一个DNA测序引物和一个内切酶，针对的检测基因为两个雌激素代谢相关基因：分别为UGT1A8基因和UGT2B7基因。
2.根据权利要求1所述的一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，所述的特异性引物是指针UGT1A8rs1042597、UGT2B7rs7439366，两个单核苷酸多态性位点，能特异性扩增出包含这两个SNPs位点的DNA片段的引物对。
3.根据权利要求1所述的一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，所述的DNA测序引物是针对UGT1A8rs1042597这一个单核苷酸多态性位点而设计，能通过DNA测序技术特异性检测出上述一个SNPs位点基因型的DNA测序引物。
4. 根据权利要求1所述的一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，所述的内切酶是针对UGT2B7rs7439366这一个单核苷酸多态性位点而设计，能通过琼脂糖凝胶电泳检测出上述一个SNPs位点基因型的 DNA 测序引物。
5. 根据权利要求2所述的一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，所述的两对特异性引物序列如下 ：
（1）UGT1A8rs1042597正向引物：5'-CAGTTCTCTCATGGCTCGCA-3；
反向引物5'-GTGTGGCTGTAGAGATCATATGCT-3'；
UGT2B7rs7439366正向引物：5'-ACCTTTTTTTTTTCTATTCCTGT-3'；
反向引物5'-CAAAATAAAACCAACAAAAGTATG-3'。
6.根据权利要求3所述的一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，所述的UGT1A8rs1014597的一对DNA测序引物序列为：
正向引物：5'-CAGTTCTCTCATGGCTCGCA-3；
反向引物：5'-GTGTGGCTGTAGAGATCATATGCT-3'。
7. 根据权利要求1所述的一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，所述的UGT2B7rs7439366的内切酶为FoKI 内切酶。
8.根据权利要求1所述的一种基因多态性变异位点早期诊断子宫内膜癌的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒每一人份包括：
10×Buffer（含MgCl2）2ul，dNTP1ul，DNA模板2ul，Easy Taq DNA聚合酶0.25ul，灭菌双蒸水18.75ul特异性引物对，每条引物各0.5ul；
PCR 扩增产物酶切体系NEB Buffer 2ul，PCR产物10ul，FoKI 内切酶0.5ul，灭菌双蒸水7.5ul；
测序反应体系 ：25% BigDye mix 1ul；3.2uM DNA测序引物1ul；125MmEDTA溶液1ul；无水乙醇15ul；70%乙醇溶液30ul；HIDI溶液8ul；ddH2O2ul。
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