[发明专利]识别人源CTLA-4并阻断其功能的全人源单克隆抗体或抗体片段及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种能特异识别人源CTLA-4并阻断其功能的全人源单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，该抗体或抗体片段包含：重链和轻链，所述的抗体片段为与抗原结合的片段；

所述的重链和轻链均包括可变区，该可变区包括互补决定区；

所述重链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用HCDR1、HCDR2和HCDR3表示；

所述轻链的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3分别用LCDR1、LCDR2和LCDR3表示；

所述的HCDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：3序列内一个或少数几个氨基酸突变的序列；

所述的HCDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：4序列内一个或少数几个氨基酸突变的序列；

所述的HCDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：5序列内一个或少数几个氨基酸突变的序列；

所述的LCDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：6序列内一个或少数几个氨基酸突变的序列；

所述的LCDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：7序列内一个或少数几个氨基酸突变的序列；

所述的LCDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：8序列内一个或少数几个氨基酸突变的序列；

少数几个氨基酸突变指抗体CDR区3个以内的氨基酸随机突变。

2.根据权利要求1所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：1或与SEQ ID NO：1中的氨基酸至少有80%同源性的氨基酸序列；

所述的轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：2或与SEQ ID NO：2中的氨基酸至少有80%同源性的氨基酸序列。

3.根据权利要求2所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的抗体或抗体片段与人CTLA-4结合的解离参数Kd值小于等于1.0×10^-12M，Kd值单位为摩尔。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段，其特征在于，所述的抗体或抗体片段为：嵌合抗体或其片段，人源化抗体或其片段，全人源抗体或其片段，或选自以下的抗体片段：Fab、F(ab’)₂、Fv、dAb和scFv。

5.一种核苷酸分子，其特征在于，该核苷酸分子编码如权利要求1-3中任意一项所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段；

该核苷酸分子的序列选自SEQ ID NO：9和/或SEQ ID NO：10；

序列SEQ ID NO：9编码所述的抗体或抗体片段的重链可变区；

序列SEQ ID NO：10编码所述的抗体或抗体片段的轻链可变区。

6.一种表达载体，其特征在于，该表达载体含有如权利要求5所述的核苷酸分子。

7.一种宿主细胞，其特征在于，该宿主细胞含有如权利要求6所述的表达载体；该宿主细胞包括293F细胞。

8.一种权利要求1-3中任意一项所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段的制备方法，其特征在于，该制备方法包含如下步骤：

步骤1：制备含有表达所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段的核苷酸分子的表达载体；

步骤2：用步骤1的表达载体转染真核宿主细胞；

步骤3：培养步骤2转染的真核宿主细胞；

步骤4：分离纯化，获得所述的抗体或抗体片段；

所述的真核宿主细胞包括293F细胞。

9.根据权利要求8所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段的制备方法，其特征在于，所述的表达载体含有选自SEQ ID NO：9和/或SEQ ID NO：10的核苷酸序列。

10.一种免疫抑制药物或包含免疫抑制药物的组合物，其特征在于，该免疫抑制药物包含如权利要求1-5中任意一项所述的能特异识别CTLA-4的全人源单克隆抗体或抗体片段；该组合物由所述的免疫抑制药物和药学上可用载体组合而成；该免疫抑制药物作为抗肿瘤的药物。