[发明专利]与肝癌诊疗相关的血清外泌体hsa-miR-17-5p及其应用

说明书

本发明公开了与肝癌诊疗相关的血清外泌体hsa‑miR‑17‑5p及其应用。本发明首先保护用于检测hsa‑miR‑17‑5p的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为如下(c1)或(c2)：(c1)鉴定或辅助鉴定肝癌细胞；(c2)诊断或辅助诊断肝癌。本发明还保护一种引物组，由逆转录引物、上游引物和下游引物组成；所述逆转录引物为序列表的序列2所示的单链DNA分子；所述上游引物为序列表的序列3所示的单链DNA分子；所述下游引物为如下序列表的序列4所示的单链DNA分子。可作为肝癌的生物标志物，具有较高诊断价值，为临床提供快速准确的诊断方式，使肝癌的诊断更加方便易行。

技术领域

本发明属于生物技术和诊断领域，具体涉及与肝癌诊疗相关的血清外泌体hsa-miR-17-5p及其应用。

背景技术

肝癌是发生率居全球第四，死亡率第二的恶性肿瘤。因为饮食、酒精性肝病尤其是肝硬化、乙肝的关系，肝癌在中国具有高发性及高危性。很多肝癌通常被发现时已经是在临床上呈现晚期，使得我国肝癌的5年生存率低于10％。因此，早期的肝硬化和肝癌的诊断至关重要。目前用于肝癌诊断的血液标志物主要是甲胎蛋白(AFP)，但是其准确度欠佳，灵敏度和特异性不足以满足肝癌的早期检测。

外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的、直径在40-100nm的盘状囊泡。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体，其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。

随着液态活检领域的发展，外泌体来源的生物标志物越来越被大家所重视。外泌体在血液循环中的稳定性及便利性，是一类非常好的循环肿瘤标志物，是无创且有效的诊断标志物。miRNA是一种内源性的、长度在22nt左右的非编码RNA，它可以通过结合靶基因的3’UTR区来调控基因的表达和功能。大量研究表明，miRNA可以作为肿瘤及其他疾病的诊断标志物。

发明内容

本发明的目的是提供与肝癌诊疗相关的血清外泌体hsa-miR-17-5p及其应用。

本发明首先保护用于检测hsa-miR-17-5p的物质在制备产品中的应用；所述产品的功能为如下(c1)或(c2)：

(c1)鉴定或辅助鉴定肝癌细胞；

(c2)诊断或辅助诊断肝癌。

所述用于检测hsa-miR-17-5p的物质为由逆转录引物、上游引物和下游引物组成的引物组；

所述逆转录引物为如下(d1)或(d2)：

(d1)序列表的序列2所示的单链DNA分子；

(d2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；

所述上游引物为如下(e1)或(e2)：

(e1)序列表的序列3所示的单链DNA分子；

(e2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；

所述下游引物为如下(f1)或(f2)：

(f1)序列表的序列4所示的单链DNA分子；

(f2)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子。

本发明还保护一种引物组，由逆转录引物、上游引物和下游引物组成；

所述逆转录引物为如下(d1)或(d2)：

(d1)序列表的序列2所示的单链DNA分子；