[发明专利]一种可特异性识别HPV18 L1蛋白的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种可特异性识别HPV18 L1蛋白的单克隆抗体，包括重链区和轻链区，其中所述重链区的序列为SEQ ID NO:1或3，或者与SEQ ID NO:1或3具有80％一致性的序列；所述轻链区的序列为SEQ ID NO:2或4，或者与SEQ ID NO:1或3具有80％一致性的序列；还涉及上述单克隆抗体在制备HPV18检测试剂中的应用；还涉及包含上述单克隆抗体的HPV18检测试剂盒。通过使用本发明的单克隆抗体及其制备的试剂和试剂盒，可检测出处于HPV活动感染期的患者，检测方便，特异性高。

技术领域

本发明涉及HPV感染检测领域，更特别地，涉及一种可特异性识别HPV18L1蛋白的单克隆抗体及其应用，及其制备的诊断试剂盒。

背景技术

人类乳头瘤病毒(Human Papillomavirus，简称HPV)是一种广为流传的、引起湿疣的性传播病原体。HPV是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属，球形DNA病毒，是一种嗜上皮性病毒，有高度的特异性，能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。HPV亚型极多，目前已分离出130余种，不同的型别引起不同的临床表现。根据感染引起的临床后果，HPV分为高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82等)和低危型(如HPV6,11,40,42-44,54,61,70,72,81等)。大多HPV感染在1-2年内会痊愈，这些低危型HPV主要引起生殖道肛周皮肤和阴道下部的外生性湿疣类病变、扁平湿疣类病变和低度子宫颈上皮内瘤样变(CINI),多呈一过性，可自然逆转。高危型HPV主要导致宫颈上皮内瘤样变(CINII-III级)和宫颈癌的发生,持续高危型HPV感染的CINⅠ级易进展为CINⅡ～Ⅲ，导致女性宫颈癌的发生。宫颈癌是妇女第二大致死癌病，临床证明95-99.7％的宫颈癌病例和高危型HPV病毒感染有关，即HPV感染是宫颈癌发生的先决必要引发条件。科学研究发现至少有20种高危型HPV与95％的早期浸润和浸润性子宫颈癌有关，特别是HPV16和HPV18二个亚型是宫颈癌的主要诱因，70％以上的宫颈癌与这二个亚型相关。

宫颈癌是威胁全球女性健康的最常见的恶性肿瘤之一，在女性人群中HPV的感染率在13.5％左右。全球每年约有宫颈癌新发病例52.8万，与宫颈癌相关的死亡人数达26.6万，2017年的研究数据显示我国每年约有13万宫颈癌新发病例，死亡病例为3万。用聚合酶链反应(PCR)对253例不同宫颈病变进行HPV DNA分型中，按慢性宫颈炎、假性湿疣、疣样病变、尖锐湿疣,CIN及宫颈癌顺序，HPV阳性率呈依次递增趋势，分别为16.7％，29.8％，37.5％，61.7％，79.7％及90.9％。应用原位PCR技术(ISPCR)对44例宫颈癌,18例癌旁组织及30例慢性宫颈炎和15例正常宫颈组织中的HPV16DNA和HPV18DNA进行检测后发现44例宫颈癌组织中HPV16DNA均为阳性79.5％，HPV18DNA阳性11.3％；15例癌旁组织伴CINII-III级，HPV16DNA阳性80％，15例正常宫颈组织HPV DNA均阴性。这些都说明宫颈癌前病变、宫颈癌与高危型HPV感染，尤其是HPV16/18感染密切相关，且随着病变程度的加重，HPV16/18检出率升高，说明检测HPV16/18是预测宫颈癌的重要指标。但国际上大多数情况下只在宫颈存在表观病变时，才对高危型HPV进行检测，往往错过了最佳的干预和治疗时机。因此早期对HPV进行分型检测，检出高危HPV亚型(尤其是HPV16/18)是十分必要的。

对HPV16/18的分型检测可带来以下好处：1)能在病毒感染早期提供诊断预警；2)可以作为医生治疗效果的评估指标，连续两次HPV分型检测显示单一型别的高危亚型的感染，显示宫颈癌发生的可能性增大，应引起极大重视；3)HPV的感染在不同的地区，占主要地位的型别有所不同，分型检测有利对于各地研究、使用疫苗进行HPV感染的预防控制。