[发明专利]一种库波热病毒的检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明提供一种库波热病毒的检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒包括氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽。该检测方法包括步骤：(1)用分离液分离待测样本，将分离好的细胞重悬于无血清培养基中；(2)向重悬后的细胞中加入氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽进行共孵育，然后向共孵育的体系中加入高特异性鼠抗人IgG抗体进行抗原抗体反应；(3)对抗原抗体反应后的体系进行洗涤，再加入显色底物进行显色反应，计数反应生成的斑点数。本发明的试剂盒能够人工全序列合成，生产方便快捷，稳定性和特异性高，且试剂盒操作简便，极大地降低了成本。

技术领域

本发明属于医疗检测技术领域，具体涉及一种库波热病毒的检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

库波热病毒(Ekpoma virus)是2015年在西非尼日利亚新发现的病毒，分1 型(EKV1)和2型(EKV2)两个亚型，主要感染牛，媒介为库蠓，全球仅有1次报道。同时该病毒与另外一种引起出血热病死率高的下刚果热病毒(Bas-congo virus)高度同源，且因病例少，病源生物形状不明。发热表现为上午体温正常，下午有低热，凌晨高烧至40℃，早晚体温有波动。库蠓是一种寄生在灌木林的吸血小虫，容易传播人畜共患疾病。因为是库蠓传播、体温波动，所以我们把它中文命名为库波热。

根据案例的流行病学调查表明，患者携带病毒时间长达3周以上，而在我国存在该病的传播媒介——库蠓，且分布种类多、地区广，一旦传入可能造成流行风险。检验检疫部门一直都在关注其生物学性状和致病机制的研究。

可以通过抗原与抗体的特异性结合，根据循环外周血中库波热病毒的抗体的数量，可以判断是否感染库波热病毒，用于库波热病毒感染的临床辅助诊断，可以快速、敏感的检测出人体的感染情况。现有对库波热病毒的检测试剂盒存在制备方法复杂、耗时长、价格昂贵等问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种库波热病毒的检测试剂盒及其检测方法，以期解决上述现有技术中存在的至少部分技术问题。

为了实现上述目的，本发明提供一种库波热病毒的检测试剂盒，其包括氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽，分别为：

SEQ ID NO.1：Gly Ala Glu Ala Ala Val Leu Glu Glu Leu Ala Ala Ala GlyIle Gln Gly Ser Thr Ala；

SEQ ID NO.2：Gln Glu Ala Gly Gly Glu Leu Glu Ser Ile Arg Val Thr AlaSer Ala Arg Thr Gly Gly；

SEQ ID NO.3：Thr Met Gly Ala Gly Glu Thr Ala Ile Glu Arg Arg Ala ProAla Thr Ala Thr Gly Ala；

SEQ ID NO.4：Ser Glu Ala Glu Glu Ala Met Asp Leu Leu Ala Thr Ile AlaSer Thr Gly Gly Ala Ala；

SEQ ID NO.5：Gly Leu Thr Ile Val Gly Glu Leu Lys Ala Gly Gly Ser AlaAla Thr Ala Ile Gly Glu；

SEQ ID NO.6：Thr Ala Ser Ala Thr Gly Leu Ile Glu Gly Asp Glu Ala AlaMet Ser Ala Ile Gly Ala。

本发明中，氨基酸序列为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示的6条多肽在试剂盒中作为TB刺激物，用于检测反应。