[发明专利]一种利用响应面法从枫香叶中优化提取原花青素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，尤其涉及一种利用响应面法从枫香叶中优化提取原花青素的方法。

背景技术

枫香为金缕梅科落叶乔木，树干高大，圆满通直，枝叶繁茂，适应性强，生长旺盛，春夏季叶色暗绿，秋季变为红色，广泛分布于我国南方各省，是我国重要的药用植物资源，也是优良的城市观赏树种，具有止血、保肝、抗菌、抗癌等多种功效。枫香树叶中含有大量叶绿素，叶绿素使树叶呈绿色，此外，它同时含有叶黄素、原花青素、糖分及其它色素和营养成分。夏季过后，白天缩短，温度下降，树叶里的叶绿素产生减少，随着天气逐渐变凉而被分解，剩下叶黄素，叶子变黄；进入深秋，天气日益寒冷，枫香叶片细胞液逐渐变成酸性，枫香树叶片中含量较多的原花青素在酸性细胞液中产生花青素，变成红色；特别是霜降节令后，经霜打过的叶片，叶绿色进一步被破坏，枝叶内贮藏的糖分增加，花青素的红色显示突出，使树叶越变越红。根据色素与糖分的多少，树叶可形成鲜红、腥红、紫红等不同色彩。

原花青素，最初是在20世纪40年代从花生仁的包衣中提取出来，在50年代又被发过科学家从海松树皮中发现并提取出来。原花青素是一种黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于各种植物中。原花青素具有多种活性功能，如抗氧化、抗癌、消炎、降血糖、预防心血管疾病、治疗肠道感染等，近年来倍受关注。由于其具有较强的清除自由基和抗氧化活性，在医药、保健品、食品、日用化妆品等领域的应用日益广阔。原花青素的提取方法有溶剂浸提、超声波辅助提取、微波辅助提取、离子液体提取、超临界提取和酶提取，常见的纯化方法有大孔树脂吸附法、凝胶色谱法、高速逆流色谱法和膜过滤法等。但是，目前还未见从枫香叶中提取原花青素的相关报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种利用响应面法从枫香叶中优化提取原花青素的方法，对乙醇体积分数、液料比、提取温度、提取时间进行优化，从而提高枫香叶中原花青素的提取率，缩短提取时间，降低能耗，有利于枫香叶资源的进一步开发利用。

本发明通过以下技术手段解决上述技术问题：

一种利用响应面法从枫香叶中优化提取原花青素的方法，利用design expert软件，进行Box-Behnken设计提取枫香叶中原花青素的乙醇体积分数、液料比、提取温度、提取时间工艺条件，枫香叶中原花青素的提取方法包括以下步骤：

步骤一，杀青粉碎：取新鲜的老叶和红叶，于95℃杀青处理，降温至40℃烘干粉碎，过40目筛，得到枫香叶粉，于0℃以下冷藏保存备用；

步骤二，脱脂过滤：将枫香叶粉用石油醚于室温避光静置脱脂24h，过滤，得到脱脂叶粉；

步骤三，乙醇提取：将脱脂叶粉投入提取罐中，以液料比20～40mL/g加入体积分数为20～40％的乙醇溶液，于80～90℃提取70～105min，过滤，反复提取两次，收集两次提取的滤液混合，得到粗提取液；

步骤四，树脂纯化：以预处理后的NKA-9型大孔树脂作为原花青素的吸附树脂，对粗提取液的原花青素进行吸附纯化，得到精提取液；

步骤五，喷雾干燥：将精提取液进行喷雾干燥，得到原花青素。

进一步，所述步骤三中加入乙醇溶液后，加入稀盐酸溶液调节pH＝4。

进一步，所述步骤三是将脱脂叶粉投入提取罐中，以液料比36mL/g加入体积分数为36％的乙醇溶液，于87℃提取85min，过滤，反复提取两次，收集两次提取的滤液混合，得到粗提取液。

进一步，所述NKA-9型大孔树脂的预处理如下：将大孔树脂在乙醇中浸泡24h后，用乙醇清洗，再用去离子水冲洗至流出液无醇味，随后用5wt％的盐酸溶液浸泡3h，用去离子水冲洗至中性，再用0.5mol/L的氢氧化钠溶液浸泡3h，去离子水冲洗至中性。

进一步，所述步骤四是将预处理后的NKA-9型大孔树脂与粗提取液混合，密封置于30℃的空气浴摇床中振荡吸附3～5h，过滤得到的树脂加入体积分数为30％的乙醇溶液中，室温振荡3～5h，抽滤得到精提取液。

进一步，所述步骤四是将预处理后的NKA-9型大孔树脂湿法装柱，将粗提取液以流速1mL/min上柱吸附，再以洗脱流速1mL/min，先后用6BV去离子水、3BV的体积分数为10％的乙醇溶液、2BV的体积分数为30％的乙醇溶液洗脱，收集30％的洗脱液，即精提取液。