[发明专利]石斛叶片复合游离氨基酸的提取方法及用途

说明书

本发明提供了一种从铁皮石斛叶片中提取复合游离氨基酸的方法，包括如下步骤：初步提取铁皮石斛叶片中的游离氨基酸获得初提液，二次萃取提取剩余游离氨基酸，去除蛋白、多糖等杂质并用活性炭吸附除杂、脱色，用酸性阳离子交换树脂纯化游离氨基酸提取液粗品，分子筛进一步纯化，结晶精制，其中获得晶体纯度高达99.5％以上。

技术领域

本发明涉及一种从石斛叶片中提取复合游离氨基酸的方法，更具体地涉及一种高产率高纯度地从铁皮石斛叶片中提取复合游离氨基酸及其用作复合氨基酸螯合物或营养补充剂的用途，属于天然产物提取纯化领域。

背景技术

氨基酸是人体必需的营养组分，是构建蛋白质的基本单位。除从日常食物获取以外，也常作为营养补充剂形式为人体获取。作为氨基酸组分的营养补充剂，植物游离氨基酸与蛋白质相比，游离氨基酸在体内更加容易被吸收利用；而蛋白质则需要在消化道中酶解分解代谢成游离氨基酸。尤其是素质主义者或肉类摄取不足者，获得足够多的必需氨基酸非常必要。与人工合成的营养品或膳食补充剂相比，人们对获自天然来源的健康补充剂和提取物产更加热衷。例如富含游离氨基酸饲的植物或植物部位如叶、花、种子等，都被认为是可用作食品级的氨基酸来源。

通常，蛋白质由20种标准氨基酸构成，而其中仅有一半左右是在人体能够自己合成的，其它不能自行合成的氨基酸被称为必需氨基酸，即赖氨酸(Lysine)、色氨酸(Tryptophan)、苯丙氨酸(Phenylalanine)、甲硫氨酸(Methionine)、苏氨酸(Threonine)、异亮氨酸(Isoleucine)、亮氨酸(Leucine)、缬氨酸(Valine)等。必须从饮食中获得这些必需氨基酸，否则可能会导致营养不良甚至身体健康问题。

石斛，一种药用植物，作为我国传统的中药材，其通常取茎舍叶，而叶中富含游离氨基酸，因此造成了大量不必要的浪费。目前，药用石斛包括鲜石斛、金钗石斛、铁皮石斛、环草石斛、马鞭石斛等；2010版药典将铁皮石斛单独列项，为兰科石斛属植物铁皮石斛的新鲜或干燥茎。研究医药表明，石斛具有极高的药用和保健功能，其药效成分包括：石斛多糖、石斛氨基酸、生物碱等。

在现有技术中，药用石斛研究主要集中在多糖的药理活性及化学结构方面。值得注意的是，除多糖外，石斛中另一有益的主要组分还包括氨基酸。石斛中的氨基酸主要以游离形式存在，是含量仅次于多糖组分，其含量要远高于其他成分例如生物碱、石斛酚、黄酮类等。游离的氨基酸也是石斛中的主要有效成分之一。

研究表明，铁皮石斛含有除色氨酸之外的全部人体必需氨基酸，其中主要氨基酸是天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、缬氨酸和亮氨酸，这5种氨基酸占总氨基酸的53％左右。其中，谷氨酸、天冬氨酸和甘氨酸的含量占总含量的36％左右。

从氨基酸的分布来说，以铁皮石斛为例，铁皮石斛11个品系的叶片中总氨基酸平均质量含量约为7.5％，茎为1.91％，叶片显著高于茎，且氨基酸组成接近FAO/WHO提出的理想蛋白质的标准，是目前食用级植物游离氨基酸的理想来源之一，具有非常大的开发潜力。

关于游离氨基酸的提取方法很多，包括超声波提取法、酶解提取法、高压热水浸提法、溶剂提取法、微波提取法等。目前应用较多的有高压热水浸提法、超声波提取法、酶解提取法等，但是只有极少的绿色且经济的方法提取和纯化植物来源的游离氨基酸法。目前提取氨基酸的相关现有技术例如：

CN105523875B涉及玫瑰花废液技术领域，是一种从提取精油后的玫瑰花废液中提取玫瑰花氨基酸的方法；经预处理、酶解、除质、纯化、脱色和干燥步骤后得到玫瑰花氨基酸粗品。在提取过程中加入果胶酶酶解后，粘性较玫瑰花废液明显下降，生产1kg玫瑰精油的玫瑰花废液中可提取10.48kg至12.78kg玫瑰花氨基酸，大大提高了玫瑰花氨基酸的吸附效率和收率；工艺简单、安全无毒和玫瑰花氨基酸粗品的纯度高，得到的玫瑰花氨基酸粗品中富含16种天然氨基酸且便于保存，实现了将提取精油后的玫瑰花废液变废为宝，避免了玫瑰花氨基酸资源的浪费，玫瑰花氨基酸粗品可用于化妆品和保健品，提高了玫瑰花的综合利用价值。