[发明专利]一种缩短硫酸软骨素提取时间的工艺

说明书

一种缩短硫酸软骨素提取时间的工艺，包括以下步骤：（1）软骨预处理；（2）双酶解：调pH值至8.8‑9.3，加入碱性蛋白酶2709，搅拌速度为20‑60rpm，酶解；调pH值至8.4‑8.8，加入活化猪胰脏，搅拌速度为20‑60rpm，酶解；（3）脱蛋白：升温至70‑80℃，搅拌速度为90‑110rpm，调节pH至等电点，处理10‑30min，停止搅拌，静置；（4）压滤；（5）碟式离心；（6）离子交换；（7）洗脱；（8）硫酸软骨素的精制。本发明在现有技术双酶法提取硫酸软骨素的技术基础上，通过对工艺路线以及工艺参数的改进，采用适当的搅拌速度，提高酶解效率，降低酶解时间，从而降低提取时间，提高收率。

技术领域

本发明涉及生化制药领域，具体是一种缩短硫酸软骨素提取时间的工艺。

背景技术

硫酸软骨素（简称CS）是一种酸性粘多糖，广泛存在于牛骨、猪骨、鸡骨、鲨鱼骨、鱿鱼骨中，属于糖胺聚糖的一种，是一种天然来源的生物大分子。硫酸软骨素由50-70个双糖单元组成，其双糖单元是由葡糖醛酸和氨基半乳糖通过β-1,3糖苷键形成，双糖再以β-1,4糖苷键连接聚合成大分子。

硫酸软骨素具有降血脂、抗凝血、抗炎症及抗肿瘤等生理功能。临床上主要作为骨关节炎、高血脂、心绞痛、动脉粥样硬化等疾病的治疗，其滴眼液具有治疗角膜损伤、角膜溃疡或角膜炎；在食品上硫酸软骨素被美国FDA归类维膳食补充，澳大利亚将其作为改善或预防关节病的营养保健品。

目前，硫酸软骨素通常采用双酶解法从动物软骨中提取，主要包括煮料、酶解、调pH脱蛋白、过滤、离心、离子交换、醇沉、干燥等步骤。但现有的双酶法在提取过程中不搅拌或者在不同环节中使用同一搅拌速度，从而导致提取时间长，酶解效果差，蛋白质去除率低，收率低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种通过控制搅拌速度缩短硫酸软骨素提取时间的工艺，以减少提取硫酸软骨素的提取时间，改善酶解效果，提高硫酸软骨素的得率。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种缩短硫酸软骨素提取时间的工艺，包括以下步骤：

（1）软骨预处理：将动物软骨在NaHCO₃清洗液中用超声波辅助清洗，再将清洗后的软骨放入提取罐，加入水，采用盘管加热和直接蒸汽加热，至95-105℃，保温2-4h（优选2.5-3.0h），然后取出上层骨油，控制搅拌速度为40-80rpm，采用盘管将蒸煮液冷却到45-55℃；

（2）双酶解：将蒸煮液调pH值至8.8-9.3，加入软骨质量0.5-0.9%的碱性蛋白酶2709，搅拌速度为20-60rpm，酶解1-3h（优选1.5-2.0h）；重新调整pH值至8.4-8.8，加入软骨质量3%-8%的活化猪胰脏（将猪胰脏粉碎，25-35℃ 活化36-60 h），搅拌速度为20-60rpm，酶解1-3h（优选1.5-2.0h）；

（3）脱蛋白：将温度升温至70-80℃，搅拌速度设置为90-110rpm，调节pH至等电点，处理10-30min，停止搅拌，静置至分层明显；

（4）压滤；

（5）碟式离心；

（6）离子交换；

（7）洗脱；

（8）硫酸软骨素的精制：将（7）的洗脱液经过氧化、压滤、超滤、醇沉、脱水离心、干燥即得硫酸软骨素。

现有技术中软骨的预处理采取夹套传热，加热和冷却速度慢，本发明加热采取盘管联合直接蒸汽加热，大大降低了升温时间；冷却时，搅拌速率过低，冷却速率慢；但搅拌速率过高，一方面搅拌产热不利于冷却，另一方面过高的搅拌速度需要消耗更多的电能。作为优选，冷却时搅拌速率为40-80rpm。