[发明专利]一种深低温停循环大鼠动物模型

权利要求书

1.一种深低温停循环大鼠动物模型，其特征在于，所述深低温停循环大鼠动物模型为：准备健康雄性大鼠60只，体重350～450g，随机分成10组；对照2组，实验组8组；

将配好的浓度为2％、5％、10％、15％脑保护液的水溶液，分别给实验组中不同两组饮用7天～15天；分别记为：T1、T2、T3、T4；

在这期间，每天定时测量大鼠的呼吸频率、气道压力、动脉压、心率变化；

将血液通过静脉引流管进入静脉壶，通过数字式可控制流量的转流泵，将血液泵入微型氧合器；配备预充液与脑保护液后，在精密恒温浴槽以及体外置冰屑环境下，停循环60min，脑保护组织间断进行顺行性脑灌注保护，然后恢复循环，体表和血液同时复温，最终测量结果。

2.一种如权利要求1所述深低温停循环大鼠动物模型的构建方法，其特征在于，所述深低温停循环大鼠动物模型的构建方法包括：准备健康大鼠、准备实验器材、大鼠体征指标测量、体外循环、预充液配置、脑保护液配置、选择性脑灌注、观察结果。

3.如权利要求2所述深低温停循环大鼠动物模型的构建方法，其特征在于，所述准备健康大鼠要求健康雄性大鼠60只，体重350～450g；

所述准备实验器材有：微型动物呼吸机，静脉壶，体外循环机，精密恒温浴槽，温度监测仪，多导生理记录仪，微型氧合器；

所述大鼠体征指标测量有呼吸频率、气道压力、动脉压、心率变化；

所述体外循环为：将静脉壶与体外循环机、微型氧合器通过1.6mm硅胶管连接。血液通过静脉引流管进入静脉壶，通过数字式可控制流量的转流泵，将血液泵入微型氧合器；

所述预充液配置步骤为：取大鼠一只麻醉后，肝素化取新鲜血液约20ml，血定安10ml，乳酸林格式液10ml，肝素1ml，碳酸氢钠1ml，混合配置；

所述脑保护液配置步骤为：2.5％低分子右旋糖酐，0.45％生理盐水500ml，碳酸氢钠11mmol，氯化钙2,5mg，20％甘露醇12.5mg，利卡多因100mg，氧含量20ml/L，预冷至4℃；

所述选择性脑灌注方法为：在精密恒温浴槽以及体外置冰屑环境下，停循环60min，脑保护组织间断进行顺行性脑灌注保护，然后恢复循环，体表和血液同时复温；

所述观察结果为：心跳恢复率达到100％，自主呼吸恢复率达到80％，常规HE染色和透射电镜观察下未见明显异常变化。

4.如权利要求2所述深低温停循环大鼠动物模型的构建方法，其特征在于，所述大鼠体征指标测量方法包括：

用激光扫描仪采集杂交图象，Array--Pro软件对杂交图像进行数字化转换、数据处理和分析，计算两组检测到信号的比值和t检验的p值，以p<0.01定义为信号有显著差异性，分析差异表达的位点。

5.如权利要求4所述深低温停循环大鼠动物模型的构建方法，其特征在于，分析差异表达的位点后还需进行：

统计学处理：根据资料的性质、分布和设计特点，应用SPSS13.0统计软件对数据进行分析。

6.如权利要求4所述深低温停循环大鼠动物模型的构建方法，其特征在于，用激光扫描仪采集杂交图象方法包括：

对深低温停循环大鼠动物模型进行超声探查，所用探头为L15-7io浅表探头，对呼吸频率、气道压力、动脉压、心率变化常回声记录，并测量大小后采集图像；

对构建的深低温停循环大鼠动物模型进行Micro CT增强扫描，Micro CT采用的造影剂为Fenestra LC，造影剂用量为0.4ml/20g，每次扫描采取的增强方式：注入造影剂后2小时进行扫描。

7.一种由权利要求1所述深低温停循环大鼠动物模型验证疗效的预防冻伤损伤和脑保护的药物，其特征在于，所述药物由干姜10g、地榆30g、生地15g、肉桂6g、陈皮10g、党参20g、菟丝子12g、杜仲12g、续断12g、炒白术15g、甘草8g、人参10g、熟附子10g、樟脑10-25g、海螵蛸5-10g、凡士林30-40g、丹参5-10g、黄芪2-5g、附子5-10g、桂枝10-15g、白芥子2-5g、熟地黄5-8g及麻黄3-7g组成。