[发明专利]一种荧光传感器在区分及检测金属离子上的应用

权利要求书

1.一种基于DNA结合铽离子构成的荧光传感器在区分及检测金属离子中的应用，其特征在于，采用三段富含鸟嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸的寡链DNA，在缓冲溶液中分别与铽离子结合，形成[G₃T]₃/Tb、[G₃T]₅/Tb、[G₃T]₆/Tb；其中，[G₃T]₃、[G₃T]₅、[G₃T]₆为所述三段DNA，Tb 为铽离子；DNA作为天线配体敏化Tb发出荧光构成所述荧光传感器，记作DNA/Tb；所述三段DNA浓度均为1~100μM；Tb的浓度为0.5~200μM；缓冲溶液为tris-HCl，其浓度为50~200 mM，pH值为7.0～9.0；反应温度为10～40℃；反应时间为5～20分钟；DNA溶液、Tb溶液和缓冲溶液的体积比为1∶1∶1；[G₃T]₃、[G₃T]₅、[G₃T]₆三段DNA序列分别为：GGGTGGGTGGGT、GGGTGGGTGGGTGGGTGGGT、GGGTGGGTGGGTGGGTGGGTGGGT；

所述区分及检测金属离子具体包括：

1）将金属离子溶液分别加入含荧光传感器的三个不同组成溶液中，孵育5分钟，用时间分辨的方法进行荧光检测，获得荧光信号；其中，所述传感器三个不同组成溶液的浓度均为1~100μM；金属离子溶液浓度为0. 001～2 mM；所述荧光检测的条件：室温条件下，激发波长为260~300 nm，扫描范围为450～650 nm，延迟时间50μs，门控时间2 ms；所述金属离子为碱金属、碱土金属、过渡/后过渡金属和/或稀土金属离子；

2）每组实验重复5次，用主成分分析的方法分析获得的荧光信号即3 DNA/Tb 传感元件×靶标个数×5个平行样，实现金属离子的区分和检测。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述碱金属为Li、Na、K、Rb和Cs；所述碱土金属为Ca、Sr、Ba和Mg；所述过渡/后过渡金属为Co、Mn、Cu、Cr、Hg、Al、Ni、Cd、Zn、Pb、Ag、Fe^Ⅱ、Fe^Ⅲ、Ti、V, Zr、Mo、Ru、Pd、Ir、Cr^Ⅵ、Sn^Ⅱ、Sn^Ⅳ和Bi；所述稀土金属为Tb、La、Ce、Y、Eu、Pr、Ho、Nd、Er、Yb、Dy、Gd、Sm、Lu、Tm和Sc。