[发明专利]紫杉醇长循环热敏脂质体的制备方法

说明书

本发明公开了紫杉醇长循环热敏脂质体的制备方法，包括以下步骤：称取处方量的氢化大豆磷脂(HSPC)‑胆固醇(CH)，比例HSPC﹕CH=3﹕1(质量比，药脂比1:33，摩尔比）置于茄形瓶中；按三氯甲烷:甲醇=3:1加入适量的三氯甲烷和甲醇的混合溶液，溶解；溶液溶解后，置于旋转蒸发仪中，50℃水浴，减压除去有机溶剂，并在氮气条件下除去残留有机溶剂；去有机溶剂后，加入适量PBS（pH 7.4）溶液，在50℃旋转水化45min，减压脱气，置于高压均质机中，使平均粒径在l00nm左右，冷冻干燥，得到冻干脂质体，4‑8℃贮藏。制备的紫杉醇长循环热敏脂质体在联合热疗后，在体内实验中不仅减小紫杉醇药物不良反应，显著增强了抗肿瘤效果，若能应用于临床，必将为紫杉醇的应用开发一条新的途径。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体是采用薄膜超声法制备紫杉醇长循环脂质体的方法及其应用。

背景技术

脂质体是一种人工球形小囊泡，是由胆固醇和天然无毒性的磷脂构成。由于其较小的粒径，以及疏水及亲水的特性(除了生物相容性)，脂质体作为一种新型药物递送系统(new drug delivery system,NDDS)，具有广阔的应用前景。脂质体之所以具有吸引力是有赖于它们的组成成分使他们具有生物相容性和生物降解能力。脂质体是由一层或多层天然或合成磷脂组成的脂质双分子层，这种由天然磷脂所组成的双分子层结构具有生物学惰性和微弱的免疫原性，以及较低的内在毒性，因此，作为药物载体，它具备一些独特的作用特点：(1)不同亲脂性的药物均可以包封在脂质体内。(2)能选择性地杀伤或抑制肿瘤细胞；(2)可针对特定病变部位进行被动或主动靶向给药，提高药物的生物利用度；(3)增加药物与癌细胞的亲和力，提高抗肿瘤药物疗效；(4)可显著降低抗肿瘤药物的毒副作用；(5)可以适用于多种给药途径。

脂质体在机体内，可被网状内皮系统吞噬，从而可激活机体自身免疫功能，进而达到抗肿瘤效果，因此，在肿瘤的治疗中彰显出巨大的优势。但脂质体的热力学不稳定以及机体血液中多种破坏因素使传统的脂质体在体内半衰期仅十几分钟，因此限制了其作为药物载体的应用。

因此，在二十世纪末，人们就发现由神经节苷(GM1)制备的脂质体，可明显延长体内的血液循环时间。但由于神经节昔脂价格昂贵，不论是合成还是提取都相对较困难，因此各位学者开始用聚乙二醇PEG替代神经节苷制备长循环脂质体，并在脂质体内加入热敏材料，制备成长循环热敏脂质体，包裹药物后联合局部热疗，即可延长药物在体内的循环时间，又可靶向将药物释放于肿瘤部位，达到靶向治疗的效果。

发明内容

本发明的目的是提供采用薄膜超声法制备紫杉醇长循环脂质体的方法及其应用，选取稳定性良好的氢化大豆磷脂为膜材，采用薄膜超声法制备紫杉醇长循环脂质体。

本发明紫杉醇长循环热敏脂质体的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取处方量的氢化大豆磷脂(HSPC)-胆固醇(CH)，比例HSPC﹕CH＝3﹕1(质量比，药脂比1:33，摩尔比)置于茄形瓶中；

(2)按三氯甲烷:甲醇＝3:1加入适量的三氯甲烷和甲醇的混合溶液，溶解；

(3)溶液溶解后，置于旋转蒸发仪中，50℃水浴，减压除去有机溶剂，并在氮气条件下除去残留有机溶剂；

(4)去有机溶剂后，加入适量PBS溶液，在50℃旋转水化45min，减压脱气，置于高压均质机中，压力15000psi依次通过200nm，100nm的聚碳酸酯膜各3次，使平均粒径在l00nm左右，冷冻干燥，得到冻干脂质体。

上述步骤(3)所述旋转蒸发仪的V_1/2>最大转速，减压40min。

上述步骤(4)所述PBS溶液的pH为7.4。

上述步骤(4)得到的冻干脂质体在4-8℃贮藏。