[发明专利]用于鉴别患者是否感染及感染种类的试剂盒

说明书

本发明涉及一种用于鉴别患者是否感染及感染种类的试剂盒，所述试剂盒包括检测患者的基因IFI44L和/或FAM89A的表达水平的试剂以及看家基因的表达水平的试剂。本发明的试剂盒能准确检测出IFI44L和FAM89A两个基因的表达丰度，从而判断患者是否感染以及感染了是病毒还是细菌，和有利于临床进行针对性的治疗。

技术领域

本发明涉及疾病检测领域，特别涉及用于鉴别患者是否感染及感染种类的试剂盒。

背景技术

呼吸道感染和消化道是人类最常见的传染性疾病之一，而儿童呼吸道和消化道感染更是儿童面临的主要公共健康问题之一，在发展中国家已成为5岁以下儿童死亡的首要病因。研究报道学龄前儿童每年平均患呼吸道和消化道感染6-10次，并有大约3％的1岁以下儿童由于中重度的呼吸道和消化道感染而住院治疗。

引发呼吸道和消化道感染的病原体种类复杂，既有病毒，也有细菌、支原体等。这些病原体引发呼吸道感染后，患者的临床表现往往都有发热、咳嗽、咽痛、流涕，可伴随全身无力、头晕、肌肉酸痛等全身症状；消化道感染则出现水样大便，甚至血便。在临床上首先区分出病毒感染还是细菌感染，对临床治疗策略的选择是有很大帮助的。例如若是病毒感染，则不用抗生素治疗，可以防止抗生素滥用。

目前临床上区分病毒和细菌感染已经有一些方法，例如通过外周血中的中性粒细胞和淋巴细胞含量的变化，以及C反应蛋白检测，来大致区分是细菌还是病毒感染，但已有的这些方法特异性和灵敏度不够，临床急需特异性和灵敏度更好的方法来区分细菌和病毒的感染。

国际学术界一直尝试着从宿主的血液中的有核疾病的基因表达的差异来区分细菌和病毒感染，因为细菌和病毒感染机体后，存在激活宿主免疫系统途径的机制差异，就必然在宿主细胞中存在针对细菌和病毒感染差异表达的基因。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术区分细菌和病毒感染方法的不足，挑选了IFI44L和FAM89A两个基因，针对这两个基因，以及内对照GAPDH基因；设计了逆转录PCR的引物和荧光TaqMan探针，在一管反应中就能准确检测出IFI44L和FAM89A两个基因的表达丰度，从而判断患者是感染了病毒还是细菌。

在一种实施方式中，本发明提供用于鉴别患者是否感染及感染种类的试剂盒，所述试剂盒包括检测患者的基因IFI44L和/或FAM89A的表达水平的试剂以及看家基因的表达水平的试剂，所述看家基因优选为基因ACTB和GAPDH。

在一种实施方式中，所述试剂盒是检测基因IFI44L、FAM89A和看家基因GAPDH三个基因一步法反转录PCR试剂盒。

在一种实施方式中，所述试剂盒包括以下引物：用于人GAPDH基因PCR扩增的引物:正向引物SEQ ID NO:1，gctcatttcctggtatgacaacg，反向引物SEQ ID NO:2，ctccccagcagtgagggt；用于人IFI44L基因PCR扩增的引物：正向引物SEQ ID NO:3，tgcactgaggcagatgct，SEQ ID NO:4，gtacaggctgggccaaat；和用于人IFI44L基因PCR扩增的引物：正向引物SEQ ID NO:5，aagcctcccaacctggac；反向引物SEQ ID NO:6tcatcgaagaagccgttc。

在一种实施方式中，所述试剂盒包括以下探针：用于人GAPDH基因检测的探针SEQID NO:9：ccctgttgctgtagccaaattcgt；用于人IFI44L基因检测的探针SEQ ID NO:10：aactggtgcaattgagagagcgt；和用于人FAM89A基因检测的探针SEQ ID NO:11：agaccaaccatctctttgcgga。