[发明专利]一种基于Wafergen Smartchip系统的高效极微量TE建库方法

说明书

本发明公开了一种基于Wafergen Smartchip系统的高效极微量TE建库方法，其具体操作步骤如下：步骤一：调试好MSND分液设备，并利用MSND分液设备自带软件设置分液程序；步骤二：根据需求配置反应试剂；步骤三：向384板内加入已混合好的对应酶试剂及样品DNA；步骤四：将芯片放置入MSND中，将配置有样品及酶试剂的384孔板放置到MSND分液设备上，执行分液程序，将384孔板内样品喷入芯片中；步骤五：将已喷入样品试剂反应液的芯片放置入SmartChip^TM TE PCR Cycler中，执行PCR(聚合酶链式反应)的程序；步骤六：PCR(聚合酶链式反应)完成后。本发明可以大大节约试剂成本，提高反应通量，同时，还能减少人为问题导致的误差或失败。

技术领域

本发明涉及Target Enrichment(TE)技术领域，特别涉及一种基于WafergenSmartchip系统的高效极微量TE建库方法。

背景技术

目标区域富集建库技术可以短时间内实现大批量样品的二代PCR(聚合酶链式反应)文库构建。其原理是设计一段针对特定位点的引物序列扩增目标区域，而后运用带有测序接头序列的通用引物对扩增序列进行二次扩增，通过二次扩增将二代测序所需的接头序列添加到目标区域，以完成文库构建的目的。目前该技术可以运用到16S\18S\ITS等基于PCR(聚合酶链式反应)技术的二代文库构建当中。但传统PCR(聚合酶链式反应)区域富集技术的每个反应所需试剂量一般都为10ul及以上，并且剂量都是人为控制，这样容易导致误差或失败，增大了试剂的成本，同时也减少了反应通量。

因此，发明一种基于Wafergen Smartchip系统的高效极微量TE建库方法来解决上述问题很有必要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于Wafergen Smartchip系统的高效极微量TE建库方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种基于WafergenSmartchip系统的高效极微量TE建库方法，其具体操作步骤如下：

步骤一：调试好MSND(WaferGen Biosystems SmartChip MultisampleNanodispenser)分液设备，并利用MSND(WaferGen Biosystems SmartChip MultisampleNanodispenser)分液设备自带软件设置分液程序；

步骤二：根据需求配置反应试剂；

步骤三：向384板内加入已混合好的对应酶试剂及样品DNA；

步骤四：将芯片放置入MSND(WaferGen Biosystems SmartChip MultisampleNanodispenser)分液设备中，将配置有样品及酶试剂的384孔板放置到MSND(WaferGenBiosystems SmartChip Multisample Nanodispenser)分液设备上，执行分液程序，将384孔板内样品喷入芯片中；

步骤五：将已喷入样品试剂反应液的芯片放置入SmartChip^TM TE PCR Cycler中，执行PCR(聚合酶链式反应)的程序；

步骤六：PCR(聚合酶链式反应)完成后，使用离心回收装置将芯片中反应液收集到洁净离心管内；

步骤七：使用磁珠纯化离心管内PCR(聚合酶链式反应)的产物，质控合格后即可作为二代文库上机测序

优选的，所述步骤二中的反应试剂包括酶试剂和引物。

优选的，所述步骤三中384板上的每个孔加入10～20ul酶试剂，5～15ul样品DNA。

本发明的技术效果和优点：