[发明专利]一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法

说明书

本发明提供了一种5‑羟基松柏醛和5‑羟基松柏醇的同步检测方法，首先，采用高效液相色谱法测定待测样品中5‑羟基松柏醛的吸光度和5‑羟基松柏醇的吸光度，其中，检测波长为243nm；所述高效液相色谱法采用梯度洗脱，所述梯度洗脱中洗脱剂包括甲醇和水；然后根据5‑羟基松柏醛的标准曲线和待测样品中5‑羟基松柏醛的吸光度，得到所述待测样品中5‑羟基松柏醛的浓度；根据5‑羟基松柏醇的标准曲线和待测样品中5‑羟基松柏醇的吸光度，得到所述待测样品中5‑羟基松柏醇的浓度。本发明提供的方法能够有效地分离5‑羟基松柏醛和5‑羟基松柏醇，而且能够分别检测5‑羟基松柏醛和5‑羟基松柏醇的浓度。

技术领域

本发明涉及物质分离检测领域，尤其涉及一种同步检测5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的方法。

背景技术

5-羟基松柏醇和5-羟基松柏醛都是梨次生代谢形成木质素过程中的关键中间代谢产物，通过研究5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的含量变化，有利于更好的研究梨的代谢途径。但是现今尚未发现一种能够分离梨及其他植物中5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇，并对梨或其他植物中5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇含量进行检测的方法。

目前，无论是在化学领域还是在生物领域对5-羟基松柏醇和5-羟基松柏醛两种化学物质的研究都较少。5-羟基松柏醇的结构式见图1，5-羟基松柏醛结构式见图2。5-羟基松柏醇和5-羟基松柏醛的结构较为相近，使得其理化性质较为相似，而且5-羟基松柏醇和5-羟基松柏醛在常温下不稳定，因此目前无法将5-羟基松柏醇和5-羟基松柏醛分离开来，也无法检测5-羟基松柏醇和5-羟基松柏醛的含量。

发明内容

本发明提供了一种能够同步检测5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的方法。

本发明提供了一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法，包括以下步骤：

(1)采用高效液相色谱法测定待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度和5-羟基松柏醇的吸光度；所述高效液相色谱法的检测器为紫外检测器，检测波长为243nm；

所述高效液相色谱法采用梯度洗脱，所述梯度洗脱包括依次进行的四个梯度，具体为第一梯度洗脱、第二梯度洗脱、第三梯度洗脱和第四梯度洗脱；所述梯度洗脱中洗脱剂包括甲醇和水，所述四个梯度中洗脱剂的流速独立地为0.9～1.3mL/min；所述第一梯度洗脱、第二梯度洗脱、第三梯度洗脱和第四梯度洗脱用洗脱剂中甲醇的体积浓度依次增加10～20％；

(2)根据5-羟基松柏醛的标准曲线和所述步骤(1)得到的待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度，得到所述待测样品中5-羟基松柏醛的浓度；

根据5-羟基松柏醇的标准曲线和所述步骤(1)得到的待测样品中5-羟基松柏醇的吸光度，得到所述待测样品中5-羟基松柏醇的浓度；

所述5-羟基松柏醛的标准曲线为5-羟基松柏醛的浓度与5-羟基松柏醛对应吸光度的线性曲线；

所述5-羟基松柏醇的标准曲线为5-羟基松柏醇的浓度与5-羟基松柏醇对应吸光度的线性曲线。

优选的，所述四个梯度中洗脱剂的组成分别为：

第一梯度洗脱用洗脱剂中甲醇和水的体积比为[5～15)︰(85～95]；

第二梯度洗脱用洗脱剂中甲醇和水的体积比为[15～25)︰(75～85]；

第三梯度洗脱用洗脱剂中甲醇和水的体积比为[25～35)︰(65～75]；

第四梯度洗脱用洗脱剂中甲醇和水的体积比为[35～45]︰(55～65]。

优选的，所述四个梯度中洗脱剂的组成分别为：

第一梯度洗脱用洗脱剂中甲醇和水的体积比为10:90；